Ингибиторы липазы желудочно-кишечного тракта — Справочник лекарств

Ингибиторы липазы (препараты для лечения ожирения) – это небольшая группа лекарственных средств, которые блокируют активность фермента, способствующего расщеплению жиров для дальнейшего их усвоения – панкреатической липазы, и используются в комплексном лечении ожирения.

Избыточный вес может выступать одним из симптомов эндокринных заболеваний (в частности, гормональных патологий гипофиза, щитовидной железы, надпочечников и т.д.), однако чаще всего ожирение возникает при чрезмерном употреблении в пищу продуктов, богатых жирами и углеводами, на фоне низкой двигательной активности (гиподинамии).

Ожирение широко распространено во всем мире, особенно в развитых и развивающихся странах, относится к так называемым «болезням цивилизации».

Люди с избыточным весом чаще других страдают гипертонической болезнью, сахарным диабетом 2 типа, имеют высокий риск развития инфарктов, инсультов и в целом гораздо более неблагоприятный прогноз общей продолжительности жизни.

Лечение ожирения должно быть комплексным. Главную роль в лечении избыточного веса относят коррекцию пищевого поведения и образа жизни – обязателен пересмотр рациона питания с ограничением животных жиров и легкоусвояемых углеводов, а также повышение физической активности (ходьба, фитнес, аэробика и т.д.). В качестве дополнения к диете и физическим нагрузкам (однако не как самостоятельная терапия) могут быть использованы и лекарственные препараты – ингибиторы панкреатической липазы.

Показания к применению

Препараты – ингибиторы липазы ­­– применяют при заболеваниях, которые сопровождаются избыточным весом: ожирении, нетипичной депрессии, которая сопровождается повышенным аппетитом, эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 2 типа, гормон-продуцирующих опухолях гипофиза, надпочечников, недостаточной функции щитовидной железы – гипотиреозе).

Фармакологическое действие

Препараты, ингибирующие липазу, блокируют активность единственного фермента, который отвечает за расщепление и всасывание жиров – панкреатическую липазу, которая входит в состав панкреатического сока поджелудочной железы.

Панкреатическая липаза расщепляет сложные жиры (триглицериды), которые не способны всосаться в кишечнике ввиду большого размера молекулы, до простых молекул – жирных кислот и моноглицеридов.

Заблокированный препаратом фермент не способен выполнять свою функцию по расщеплению и всасыванию сложных жиров. Поскольку жиры при этом не усваиваются, снижается общее поступление в организм калорий. Это в конечном счете приводит к снижению массы тела пациента с избыточным весом.

Классификация ингибиторов липазы

К ингибиторам липазы относят препарат орлистат.

Основы лечения ожирения

Ингибиторы липазы выступают лишь дополнительным, вспомогательным средством в лечении ожирения и ни в коем случае не могут заменить диету и физические нагрузки.

Препараты орлистата относятся к категории безрецептурных лекарственных средств, то есть отпускаются из аптек без рецепта врача. Однако пациентам все же рекомендуется согласовать прием ингибиторов липазы с врачом, поскольку орлистат влияет на всасывание других лекарственных средств, например, противоэпилептических, антиаритмических, гормональных противозачаточных препаратов.

Длительность лечения орлистатом индивидуальна, зависит от тяжести состояния, сопровождаемого избыточным весом. При необходимости препараты, ингибирующие липазу, можно применять неограниченно долго.

Орлистат принимают во время основного приема пищи или же сразу после еды не менее 3-4 раз в день.

Особенности лечения ожирения

Системные побочные эффекты, включая аллергические реакции, нарушения в работе печени или почек и т.д., орлистат вызывает очень редко, поскольку практически не всасывается в желудочно-кишечном тракте.

Выраженным побочным действием препаратов ингибиторов липазы является жирный кал (стеаторея) – поскольку сложные жиры не расщепляются и не всасываются, они выводятся с каловыми массами. Стеаторея может сопровождаться повышенным газообразованием в кишечнике, диареей и недержанием кала. Для профилактики развития подобных эффектов следует существенно ограничить употребление продуктов, богатых жирами – до 30% суточного рациона.

Орлистат снижает всасывание жирорастворимых витаминов – А, Д, Е, К, поэтому при использовании ингибиторов липазы целесообразно периодически применять курс препаратов витаминных комплексов.

Ингибитор липаз ЖКТ — список препаратов фармако-терапевтической группы (ФТГ) в справочнике лекарственных средств Видаль

показания и противопоказания, состав и дозировка – АптекаМос

Оценка эффективности фармакотерапии артериальной гипертензии с метаболическими нарушениями | Дёмин

1. Бондарь И.А., Демин А.А., Медведева О.М. Применение моксонидина и эпросартана в лечении артериальной гипертензии при сахарном диабете Тез докл 2-го Всероссийского диабетологического конгресса «Сахарный диабет и сердечно-сосудистые осложнения». Москва 2002; 39.

2. Волкова Н.И., Крыжановская И.О., Лебеденко Е.Ю. Влияние терапии ожирения на основные показатели сердечнососудистого риска у женщин перименопаузального периода. Артер гиперт 2002; 8(1): 19-22.

3. Демин А.А. Современные принципы лечения артериальной гипертензии. Клин мед 2003; 5: 4-9.

4. Задионченко В.С, Хруленко С.Бадашева Т.В., Погонченкова И.В. Применение эналаприла у больных артериальной гипертонией с метаболическими нарушениями. Кардиология 2000; 10: 38-41.

5. Задионченко В.С., Хруленко С.Б. Антигипертензивная терапия у больных артериальной гипертензией с метаболическими факторами риска. Клин фармакол тер 2001; 10(3): 28-32.

6. Изможерова Н.В., Попов А.А., Андреев А.Н. Применение орлистата (ксеникала) на фоне заместительной гормональной терапии в перименопаузе. Клин фармакол тер 2003; 1: 47-9.

7. Мильто А.С., Толкачева В.В., Кобалава Ж.Д. Моксонидин в комбинированной терапии гипертонической болезни с высоким риском сердечно-сосудистых осложнений. Клин фармакол тер 2002; 10(4): 68-71.

8. Мычка В.Б., Творогова М.Г., Яськова К.Н., Чазова И.Е. Терапия ксеникалом больных артериальной гипертонией и метаболическим синдромом. Артер гиперт 2002; 8(1): 16-9.

9. Новиков В.И., Милягина И.В. Влияние эналаприла на суточный профиль артериального давления и клиникометаболические показатели у больных инсулиннезависимым сахарным диабетом с артериальной гипертонией. Кардиология 2001; 2: 27-9.

10. Подзолков В.И., Брагина А.Е., Маколкин В.И Патогенетическая роль моксонидина при лечении артериальной гипертензии у женщин в перименопаузе. Кардиология 2002; 11: 32-5.

11. Трусов В.В., Аксенов К.В. Физиотенз – новое направление в терапии артериальной гипертонии у больных сахарным диабетом типа 2. Артер гиперт 2002; 8(4): 125-8.

12. Armah BL, Hofferber E, Stenzel W. General pharmacology of the novel centrally acting anti-hypertensive agent moxonidine. Arzneim Forsch 1988; 39(10): 1426-34.

13. Cote I, Gregorie JP, Moisan J. Health-Related Quality-of-Life measurement in Hypertension. A Review of randomized controlled drug trails. Pharmacoeconomics 2000; 18(5): 435-50.

14. Davison MH, Hauptman J, DiGirolamo M, et al. Weight control and risk factor reduction in obese subjects treated for 2 years with orlistat: a randomized controlled trial. JAMA 1999; 281: 235-42.

15. Demin AA, Bondar IA, Medvedeva OM. Moxonidine has positive influence on metabolic disturbances in hypertensive patients with a Type 2 diabetes mellitus Materials of the 18th International Diabetes Federation Congress. Paris 2003; 4 S314.

16. Grundy SM, Pasternak R, Greenland P, et al. Assessment of cardiovascular risk by use of multi-ple-risk-factor assessment equations. A State-ment for Healthcare Professionals from the American Heart Association and the American College of Cardiology. Circulation 1999; 100: 1481-92.

17. Hamilton CA. Chemistry, mode of action and Experimental pharmacology of moxonidine. In: van Zwieten P.A et al editors. The putative l1-imidazoline Receptor Agonist Moxonidine. 2nd Edition. London. Roy Soc Med 1996; 7-30.

18. Medvedeva O.M. Moxonidine and eprosartan in the treatment of arterial hypertension with metabolic syndrome. Materials of the 6th Russian-Korean International Symposium on Science and Technology. Novosibirsk 2002; 268.

Студентам 3 курса специальностей «Лечебное дело» и «Педиатрия»! :: Петрозаводский государственный университет

Студентам 3 курса специальностей «Лечебное дело» и «Педиатрия» к двадцать третьему занятию по дисциплине «Фармакология» (12.03–18.03.2018) подготовить тему №23 «Гормональные лекарственные средства. Средства, применяемые при ожирении«.

На занятие принести:

1. По 1 экземпляру каждой формы рецептурных бланков (всего 5 шт.), незаполненные. Рецептурные бланки можно скачать с сайта кафедры
2. Тетрадь с выписанными рецептами.

Вопросы для повторения:

Определение, функции гормонов в организме. Локализация гормональных рецепторов, физиологические эффекты при стимуляции рецепторов. Классификация гормональных лекарственных средств по химическому строению (пептидные, производные аминокислот, стероидные соединения).

Вопросы для подготовки:

1. Препараты гормонов гипоталамуса. Бусерелин, Трипторелин, Октреотид. Фармакологические эффекты при применении, показания, противопоказания к назначению. Антагонисты гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ) (Ганиреликс). Ингибитор секреции ГнРГ (Даназол). Стимуляторы дофаминовых рецепторов гипоталамуса: бромокриптин. Показания к применению. Побочные действия.
2. Препараты гормонов гипофиза. Соматропин. Тиротропин альфа. Тетракозактид. Гонадотропин хорионический. Фоллитропин-бета. Окситоцин, Карбетоцин. Десмопрессин. Терлипрессин. Фармакологические эффекты при применении, показания, противопоказания к назначению.
3. Препараты гормонов эпифиза: Мелатонин. Фармакологические эффекты при применении, показания к назначению.
4. Препараты гормонов щитовидной, паращитовидных желез. Левотироксин натрия. Лиотиронин, Кальцитонин, препарат-аналог гормона паращитовидных желез: Терипаратид. Фармакологические эффекты при применении, показания к назначению.
5. Антитиреоидные средства. А). Угнетающие продукцию ТТГ: Калия йодид. Б). Угнетающие продукцию тиреоидных гормонов: Тиамазол, Пропилтиоурацил. В) Разрущающие клетки фолликулов щитовидной железы: радиоактивный йод. Фармакологические эффекты, показания к применению.
6. Препараты гормона поджелудочной железы. А). Препараты с быстрым развитием действия и кратковременным действием: актрапид НМ. Б). Препараты со средней скоростью развития максимального эффекта и средней продолжительностью действия: Инсулин-изофан (человеческий генноинженерный). В). Препараты с медленным развитием эффекта и длительным действием. Способы введения, подбора дозировки, показания к применению, побочные эффекты при подкожном введении, при внутривенном введении.
7. Синтетические гипогликемические средства: А) стимулирующие высвобождение эндогенного инсулина: 1). Производные сульфонилмочевины: Глибенкламид, Глипизид. 2). производные D-фенилаланина: Натеглинид. Б). Средства, угнетающие глюконеогенез и способствующие поступлению глюкозы в ткани: бигуаниды (Метформин). В). понижающие резистентность тканей к инсулину: Пиоглитазон. Г). Средства, угнетающие всасывание глюкозы в тонкой кишке: Акарбоза. Д). Инкретиномиметики: агонисты глюкагоноподобного пептида-1 (эксенатид), ингибиторы дипептидилпептидазы-4 (ситаглиптин, вилдаглиптин). Фармакологические эффекты, показания к применению.
8. Препарат гормона поджелудочной железы: Глюкагон. Фармакологическое действие, показания к применению, форма выпуска.
9. Препараты глюкокортикостероидных гормонов. Классификация: естественные ГКС, синтетические ГКС. Фармакологические эффекты ГКС. Глюко- и минералокортикоидная активность ГКС. Гидрокортизон. Преднизолон, Метилпреднизолон. Дексаметазон. Триамцинолон. Беклометазон. Бетаметазон. Формы выпуска. Показания к применению, противопоказания. Побочные действия. Пересчет доз для ГКС. Ингибиторы синтеза гормонов коры надпочечников: Мифепристон. Показания к применению.
10. Препарат-антагонист минералокортикоидного гормона: Спиронолактон. Фармакологические эффекты, показания к назначению.
11. Препараты женских половых желез: эстрогенные препараты: Эстрадиол, Этинилэстрадиол, Эстриол. Антиэстрогенные средства: Кломифен, Тамоксифен. Фармакологические эффекты, показания и противопоказания к примнению. Формы выпуска.
12. Препараты для заместительной гормональной терапии. Классификация: эстроген-гестагенные, эстроген-андрогенные, эстроген-антиандрогенные. Препараты с эстрогенной, гестагенной и андрогенной активностью: Тиболон («Ливиал»). Показания к применению. Противопоказания.
13. Гестагенные препараты: Прогестерон. Антигестагенные средства (Мифепристон). Механизм действия, показания к применению, противопоказания.
14. Стероидные средства, применяемые для контрацепции. Комбинированные оральные эстроген-гестагенные препараты: однофазные, двухфазные, трехфазные. Гестаген-содержащие препараты. Имплантационные пролонгированные препараты (содержащие левоноргестрел). Контрацептивные вагинальные кольца с гестагенами. Внутриматочные контрацептивы с гестагенами («Мирена» — левоноргестрел). Посткоитальные препараты: «Постинор» (Левоноргестрел). Особенности использования, механизм действия, показания, противопоказания, побочные эффекты.
15. Гормональные препараты мужских половых желез и их синтетические аналоги: тестостерон. Фармакологические эффекты, показания к использованию, побочные действия. Антагонисты андрогенов: ципротерон, финастерид. Механизм действия. Показания к использованию.
16. Анаболические стероиды: нандролон. Фармакологические эффекты, показания к использованию, противопоказания. Формы выпуска, правила выписки.

Средства, применяемые при ожирении.

17. Принципы лечения ожирения. Классификация лекарственных средств: средства, подавляющие аппетит (анорексигенные). Средства, нарушающие всасывание жиров в пищеварительном тракте (ингибиторы липаз). Другие препараты для лечения ожирения: средства, замещающие жиры по органолептическим свойствам, средства, заменяющие сахар, синтетические гипогликемические средства, ингибиторы обратного захвата катехоламинов.
18. Анорексигенные средства. Средства, влияющие на катехоламинергическую систему (фепранон, фенфлурамин). Средства, влияющие на катехоламиергическую и серотонинергическую систему (сибутрамин). Механизм действия. Побочные эффекты. Показания.
19. Средства, нарушающие всасывание жиров в пищеварительном тракте (ингибиторы липаз ЖКТ): орлистат. Механизм действия.
20. Средства, заменяющие по органолептическим свойствам жиры (олестра, отсутствует в ГРЛС)
21. Средства, заменяющие сахар (глюкоманнан, в ГРЛС отсутствует)
22. Синтетические гипогликемические средства. Пероральные сахароснижающие средства (метформин). Средства, угнетающие всасывание глюкозы в тонкой кишке: акарбоза. Прочие гипогликемические средства (Эксенатид)
23. Селективные ингибиторы обратного захвата норадреналина и дофамина (бупропион).

Литература для подготовки:

1. Фармакология [Электронный ресурс]: учебник / Д.А. Харкевич. – 11-е изд., испр. и доп. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2015. – URL: http://www.studmedlib.ru/book/ISBNhtml.
2. Фармакология [Электронный ресурс]: учебник / под ред. Р.Н. Аляутдина. – 5-е изд., перераб. и доп. — Электрон. дан. – Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2016. – URL: http://www.studmedlib.ru/book/ISBNhtml.
3. Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей / М.Д. Машковский, науч.ред.: С.Д.Южаков. – Изд. 15-е, перераб., испр. и доп. – Москва: Новая Волна, 2008. – 1206 с.
4. Государственный реестр лекарственных средств. – Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/GRLS.aspx
5. Акимов Д.В. Глюкокортикоиды: Учебное пособие / Д.В. Акимов, И.А. Виноградова, Е.В. Шурыгина. Петрозаводск, 1996.
6. Виноградова И.А. Гормональные противозачаточные средства: Учебное пособие / И.А. Виноградова, О.К. Погодин, А.И. Шевченко. Петрозаводск, 2003.

Выписать к занятию в тетрадь и уметь выписать на память следующие препараты, с указанием фармакологической группы лекарственного средства и состояния, при котором это лекарственное средство может быть назначено, формы рецептурного бланка:

1. Бромокриптин (таб.)
2. Октреотид (амп.)
3. Окситоцин (амп.)
4. Левотироксин натрия (таб.)
5. Метформин (таб.)
6. Мазь гидрокортизона.
7. Дексаметазон (амп.)
8. Прогестерон (амп.)
9. Ретаболил (амп.)

Кафедра фармакологии, организации и экономики фармации

Ксеналтен капсулы 120мг №84 в наличии в 0 аптеках Москвы и Санкт-Петербурга

Ксеналтен капсулы 120мг №84

Инструкция по применению

Ксеналтен капс. 120мг №84

Лекарственные формы

капсулы 120мг

Синонимы

Ксеникал

Листата

Листата Мини

Орсотен

Орсотен слим

Группа

Ингибиторы липаз желудочно-кишечного тракта

Международное непатентованное название
Орлистат

Состав

Активное вещество: орлистат.

Производители

Оболенское фармацевтическое предприятие (Россия)

Фармакологическое действие
Специфический ингибитор желудочно-кишечных липаз. Инактивированный фермент теряет способность расщеплять жиры пищи, поступающие в форме триглицеридов (ТГ). Нерасщепленные ТГ не всасываются, и возникающее вследствие этого уменьшение поступления калорий в организм приводит к уменьшению массы тела. Увеличивает концентрацию жира в каловых массах через 24 — 48 ч. после приема. Обеспечивает эффективный контроль массы тела, уменьшение депо жира. Для проявления активности не требуется системная абсорбция, он примерно на 30% ингибирует всасывание поступающих с пищей жиров. Абсорбция — низкая; через 8 часов после приема внутрь неизмененный орлистат в плазме не определяется (концентрация ниже 5 нг/мл). In vitro активного вещества более чем на 99% связывается с белками плазмы, в основном с липопротеинами и альбумином. Минимально проникает в эритроциты. Метаболизируется главным образом в стенке желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) с образованием фармакологически неактивных метаболитов. Орлистат и его метаболиты также подвергаются экскреции с желчью. Около 97% введенного радиоактивно меченного вещества выводилось с фекалиями, в т.ч. 83% — в неизмененном виде. Время полной элиминации с фекалиями и мочой — 3-5 дней. Выведение оказалось сходным у пациентов с нормальной массой тела и с ожирением. На основании ограниченных данных, период полувыведения абсорбированного активного вещества колеблется в пределах 1-2 ч.

Побочное действие
Со стороны органов ЖКТ: маслянистые выделения, метеоризм, императивные позывы на дефекацию, жирный/маслянистый стул, учащение дефекации, недержание кала, боль/дискомфорт в животе, тошнота, инфекционная диарея, боль/дискомфорт в прямой кишке, рвота. Со стороны нервной системы и органов чувств: головная боль, головокружение, утомляемость, нарушение сна, тревожность, депрессия. Со стороны респираторной системы: инфекции верхних дыхательных путей, инфекции нижних дыхательных путей, симптомы со стороны лор-органов, отит. Со стороны мочеполовой системы: нерегулярный менструальный цикл, вагинит, инфекции мочевыделительной системы. Со стороны опорно-двигательного аппарата: боль в спине, боль в нижних конечностях, артралгия, миалгия, нарушение функции суставов, тендинит. Со стороны кожных покровов: сыпь, сухость кожи. Прочие: грипп, отек стоп, аллергические реакции.

Показания к применению
Лечение ожирения, в т.ч. уменьшение и поддержание массы тела, в сочетании с гипокалорийной диетой. Также показан для уменьшения риска повторной прибавки массы тела после ее первоначального снижения.

Противопоказания

Гиперчувствительность, синдром мальабсорбции, холестаз.

Способ применения и дозировка
Внутрь, 120 мг 3 раза в сутки во время каждого приема пищи или не позднее чем через 1 час после еды (если пища не содержит жира, то прием можно пропустить).

Передозировка

Однократный прием 800 мг препарата или его многократный прием в дозе до 400 мг 3 раза в сутки в течение 15 дней людьми с нормальной массой тела и с ожирением не сопровождался значимыми побочными явлениями. Если выявлена значительная передозировка, следует наблюдать за состоянием пациента в течение 24 ч. По данным исследований на животных и человеке, системные эффекты, связанные с липазингибирующими свойствами орлистата, должны быть быстро обратимыми.

Взаимодействие

Не влияет на фармакокинетику алкоголя, дигоксина (назначенного в однократной дозе) и фенитоина (назначенного в однократной дозе 300 мг), на биодоступность нифедипина (таблетки пролонгированного высвобождения), овуляторно-супрессивную активность пероральных контрацептивов, фармакокинетику (как R-, так и S-энантиомера) и фармакодинамику (протромбиновое время и уровень VII фактора) варфарина. Алкоголь не влиял на фармакодинамику (экскреция жиров с калом) и системную экспозицию орлистата. По предварительным данным, при одновременном применении орлистата и циклоспорина уровень последнего в плазме понижается (орлистат и циклоспорин не должны приниматься одновременно; для уменьшения вероятности лекарственного взаимодействия циклоспорин следует принимать за 2 ч до или через 2 ч после приема орлистата). Орлистат уменьшает всасывание бета-каротина, содержащегося в пищевых добавках, на 30% и ингибирует всасывание витамина Е (в форме токоферола ацетата) приблизительно на 60%. Увеличивает биодоступность и гиполипидемический эффект правастатина, повышая его концентрацию в плазме на 30%. Уменьшает всасывание жирорастворимых витаминов. Влияние орлистата на всасывание витаминов D, A, содержащихся в добавках, на сегодняшний день неизвестно. Хотя уровень карбоксилированного остеокальцина, маркера поступления с пищей витамина К, при приеме орлистата не изменялся, у принимавших орлистат людей выявлялась тенденция к снижению содержания витамина К. Снижение массы тела может улучшить обмен веществ у больных сахарным диабетом, вследствие чего необходимо уменьшить дозу пероральных гипоглекимических ЛС. Клинически значимые взаимодействия с дигоксином, фенитоином, пероральными контрацептивами, нифедипином, глибенкламидом, фуросемидом, каптоприлом, атенололом, и этанолом не отмечены.

Особые указания
С осторожностью применять при беременности и в период лактации, при наличии гипероксалурии в анамнезе, нефролитиаза (кальциевые оксалатные камни). В период лечения необходимо соблюдать сбалансированную, низкокалорийную диету, содержащую не более 30% калоража в виде жиров и обогащенную фруктами и овощами (возможно дополнительное назначение поливитаминов для компенсации уменьшения всасывания жирорастворимых витаминов). Перед назначением препарата следует исключить органическую причину ожирения, например гипотиреоз. Вероятность развития побочных явлений со стороны ЖКТ увеличивается при высоком содержании в пище жиров (более 30% суточной калорийности). Суточный прием жиров, углеводов и белков должен быть распределен между тремя основными приемами пищи. Поскольку активное вещество уменьшает всасывание некоторых жирорастворимых витаминов, для обеспечения адекватного их поступления в организм пациенты должны принимать поливитаминные препараты, содержащие жирорастворимые витамины. Кроме того, содержание витамина D и бета-каротина у пациентов с ожирением может быть ниже, чем у людей, не страдающих ожирением. Поливитамины следует принимать за 2 ч до или через 2 ч после приема орлистата, например перед сном. Прием в дозах, превышающих 120 мг 3 раза в сутки, не обеспечивает дополнительного эффекта. У пациентов, одновременно принимающих орлистат и циклоспорин, требуется более частый мониторинг содержания циклоспорина в плазме. У пациентов, не получавших профилактически витаминные добавки, при двух и более последовательных визитах к врачу на протяжении первого и второго годов лечения орлистатом было зафиксировано понижение уровня витаминов в плазме. У некоторых пациентов на фоне орлистата может увеличиваться содержание оксалатов в моче. Как и для других препаратов для уменьшения массы тела, у некоторых групп пациентов (например, с нервной анорексией или булимией) существует вероятность злоупотребления орлистатом. Поскольку абсорбция витамина К при приеме препарата может уменьшаться, у пациентов, получающих орлистат на фоне длительного постоянного приема варфарина, следует внимательно контролировать параметры свертывания крови. Индукция орлистатом потери массы тела может сочетаться с улучшением метаболического контроля сахарного диабета, что потребует уменьшения доз пероральных гипогликемических средств (производных сульфанилмочевины, метформина и др.) или инсулина. Лечение не должно продолжаться более 2 лет. Не предназначен для применения в детской практике.

Условия хранения
В сухом защищенном от света, в недоступном для детей месте при температуре не выше 25 С. 

Ингибитор фермента млекопитающих продлил жизнь круглым червям в полтора раза

Caenorhabditis elegans

Wikimedia commons

Американские исследователи обнаружили, что вещество JZL184 из класса карбаматов,
которое ранее было известно как ингибитор липазы млекопитающих, участвующей в
распаде медиаторов эндоканнабиноидного пути, продлевает жизнь круглым червям на
45 процентов. Несмотря на то, что такого же фермента у червей нет, ученые
обнаружили мишень молекулы и показали, что этот фермент выполняет ту же
функцию, что у млекопитающих. Таким образом, в продлении жизни оказался
задействован не конкретный белок, а целый метаболический путь, консервативный у
животных, заключают авторы в статье в Nature Chemical Biology.

В работе ученые из института Скриппса (США) исследовали малые молекулы, подавляющие
активность ферментов класса сериновых гидролаз, представители которого уже были
ранее уличены в регуляции продолжительности жизни нематод Caenorhabditis
elegans. Эти микроскопические черви
часто становятся моделью для исследования продолжительности жизни, так как в
норме живут всего две-три недели, и для них хорошо разработаны методы генной
инженерии. В эксперименте в питательную среду, где жили нематоды, добавляли
различные компоненты из библиотеки ингибиторов гидролаз и наблюдали за
продолжительностью жизни животных.

Из 95 веществ только несколько компонентов
удлинили жизнь червей примерно на 15 процентов, однако самый значительный
результат показало вещество под названием JZL184, которое увеличило
продолжительность жизни нематод на 45 процентов. Этот компонент был открыт как
ингибитор моноацилглицерол липазы (MAGL) млекопитающих, которая вносит основной вклад в разрушение
эндоканнабиноида 2-AG,
в большом количестве представленного в центральной нервной системе. У Caenorhabditis
elegans нет фермента MAGL, но эндоканнабиноидная
система имеется.

Схема эксперимента по скринингу (вверху) и результат исследования библиотеки компонентов (внизу). По шкале ординат отложено изменение продолжительности жизни животных в процентах

Alice Chen et al / Nature Chemical Biology 2019

При помощи масс-спектрометрии исследователи выяснили, что
основной мишенью JZL184
в организме червей является гидролаза жирных кислот FAAH-4. Несмотря на отсутствие
структурного сходства с MAGL,
оказалось, что этот фермент выполняет ту же функцию, то есть гидролиз 2-AG, а JZL184 подавляет эту активность. Интересно,
что ингибитор родственного фермента FAAH-1, который участвует в деградации другого эндоканнабиноида
анандамида и есть как у млекопитающих, так и у червей, не увеличил продолжительность
жизни нематод.

Чтобы подтвердить участие FAAH-4 в продолжительности жизни червей, авторы работы сделали
генно-модифицированных нематод без гена, кодирующего фермент. Оказалось, что
мутантные по FAAH-4
нематоды действительно живут дольше, вероятно, за счет повышенной устойчивости
к окислительному стрессу. В их организме наблюдалось накопление моноацилглицеридов,
в том числе 2-AG. Интересно,
что в отличие от червей, политых ингибитором, мутантные черви отличались
повышенным аппетитом. Так как ограничение калорий тоже является фактором продления
жизни, ученые предположили, что повышенный аппетит развивается как
компенсаторный механизм увеличения продолжительности жизни.

Авторы работы заключают, что метаболизм липидов, в
частности, в эндоканнабиноидной системе, стоит более детально изучить в
контексте вклада как в старение организма в целом, так и в старение мозга. Пока что
более известным механизмом, связанным со старением, является аутофагия. Недавно
мы рассказывали, что компонент из растения ашитабы, применяемого в восточной
медицине, за счет активации аутофагии в клетках увеличил жизнь беспозвоночных
животных на 20 процентов, а мышей частично защитил от инфаркта.

Дарья Спасская

Ингибиторы липазы

• ИМТ — Индекс массы тела
• GI — Желудочно-кишечный
• RCT — Рандомизированное контролируемое исследование

• Ингибиторы липазы
• Alli® (Орлистат, капсула 60 мг) — продается без рецепта (OTC)
• Ксеникал® (Орлистат 120 мг капсулы) — по рецепту врача

• Ингибиторы липазы
• Липаза — это фермент, секретируемый в кишечник поджелудочной железой и
  желудок
• Липаза метаболизирует пищевые жиры, чтобы они могли усваиваться
  кишечник
• Орлистат блокирует липазу, и всасывание жира в кишечнике снижается на
  около 30% (доза 120 мг)
• Все действие орлистата происходит в просвете кишечника [10]

• Xenical®
• Потеря веса или поддержание веса у пациентов с ИМТ ≥ 30 или ≥ 27 при наличии других факторов риска (например,г., гипертония, сахарный диабет, дислипидемия)

• Обзор
• Влияние орлистата на потерю веса изучалось в рандомизированном контролируемом исследовании, подробно описанном ниже.
• Также представлен Кокрановский метаанализ, объединивший результаты 14 исследований.

Орлистат и плацебо для снижения веса у пациентов с ожирением, Исследования ожирения (2000)
[Аннотация PubMed]

• В исследование ожирения приняло участие 729 пациентов со средним ИМТ 35

Основные критерии исключения

• Потерянная масса тела> 4 кг за предыдущие 3 месяца
• История хирургии похудания
• Медикаментозный диабет
• Неконтролируемая гипертензия

Базовые характеристики

• Средний возраст 44 года
• Средний вес — 215 фунтов (98 кг)
• Средний ИМТ — 35

Рандомизированные группы лечения

• Группа 1 (239 пациентов) — Орлистат 60 мг 3 раза в сутки
• Группа 2 (242 пациента) — Орлистат 120 мг 3 раза в сутки
• Группа 3 (237 пациентов) — Плацебо
• Был 4-недельный подготовительный период перед рандомизацией, когда пациенты должны были соблюдать диету с дефицитом 600 калорий в день
• Пациенты были проинструктированы продолжать диету после рандомизации.После первого года диета была скорректирована для пациентов, потерявших ≥ 3 кг, до 10% дефицита калорий в день.

Первичный результат: Снижение веса за два года

Результаты

Выводы: Орлистат, принимаемый в течение 2 лет, способствует снижению веса и минимизирует его восстановление.Кроме того, терапия орлистатом улучшает липидный профиль, артериальное давление и качество жизни.

• ИССЛЕДОВАНИЕ

  Долгосрочная фармакотерапия ожирения и избыточной массы тела, Кокрановский метаанализ (2004) [аннотация PubMed]

• Кокрановский метаанализ оценил испытания по снижению веса с орлистатом, которые длились не менее одного года
• В анализ были включены результаты 14 исследований, в которых участвовали 9389 пациентов
• Доза орлистата во всех исследованиях составляла 120 мг трижды в день
• При испытаниях продолжительностью не менее одного года орлистат оказал следующее влияние на потерю веса:
• Пациенты, принимавшие орлистат, потеряли в среднем 2 балла.Масса тела на 9% (95% ДИ, 2,3 — 3,4) больше, чем у плацебо
• Пациенты, принимавшие орлистат, потеряли в среднем на 6,3 фунта (95% ДИ, 5,06–6,82) больше массы тела, чем плацебо [1]

• Сводка
• На основании описанных выше исследований поставщики медицинских услуг могут ожидать следующего при назначении орлистата:
• Около 40% пациентов перестают принимать его
• Пациент с ИМТ 35, который весит около 215 фунтов, может ожидать, что потеряет примерно на 7 фунтов больше при приеме орлистата за 2 года, чем если бы он его не принимал

• Обзор
• Поскольку орлистат блокирует всасывание жира, он также может снижать уровень холестерина
• Изменения липидных параметров, вызванные орлистатом, по данным Кокрановского метаанализа и исследования XENDOS, представлены ниже

• ИССЛЕДОВАНИЕ

  Долгосрочная фармакотерапия ожирения и избыточной массы тела, Кокрановский метаанализ (2004) [аннотация PubMed]

• Кокрановский метаанализ оценил испытания по снижению веса с орлистатом, которые длились не менее одного года
• В испытаниях, в которых измеряли параметры липидов, было замечено следующее:
• Общий холестерин снизился в среднем на 12 мг / дл по сравнению с плацебо (13 испытаний)
• Холестерин ЛПНП снизился в среднем на 10 мг / дл по сравнению с плацебо (13 испытаний)
• Холестерин ЛПВП снизился в среднем на 1.1 мг / дл по сравнению с плацебо (11 испытаний)
• Уровни триглицеридов существенно не изменились (11 испытаний) [1]

• Пробная версия XENDOS
• В исследовании XENDOS , которое длилось 4 года, пациенты, принимавшие орлистат 120 мг три раза в день, имели среднее снижение холестерина ЛПНП на 12,8% по сравнению с 5,1% для
  пациенты, принимающие плацебо [8]

• Сводка
• Орлистат, по-видимому, оказывает умеренное положительное влияние на параметры липидов
• Статины намного эффективнее и предпочтительнее

• Обзор
• В исследовании XENDOS, подробно описанном ниже, сравнивали орлистат с плацебо для профилактики диабета 2 типа у взрослых с избыточной массой тела

Испытание XENDOS — Орлистат против плацебо для профилактики диабета 2 типа, Уход за диабетом (2004) [аннотация PubMed]

• В исследование XENDOS было включено 3305 пациентов с ИМТ ≥ 30 и средней массой тела 242 фунтов

Основные критерии включения

• 30-60 лет
• ИМТ ≥ 30
• Нормальный уровень сахара в крови или нарушение толерантности к глюкозе (FBS <120 мг / дл и OGTT 120-180 мг / дл)

Основные критерии исключения

• Диабет
• Сердечно-сосудистые заболевания
• Заболевания желудочно-кишечного тракта

Базовые характеристики

• Средний возраст 43 года
• Средний вес — 242 фунта (110 кг)
• Средний ИМТ — 37
• Средний уровень сахара в крови натощак — 83 мг / дл
• Пациенты с нарушением толерантности к глюкозе — 21%

Рандомизированные группы лечения

• Группа 1 (1640 пациентов) — Орлистат 120 мг 3 раза в день + консультирование по снижению веса
• Группа 2 (1637 пациентов) — Плацебо + консультирование по снижению веса
• Всем пациентам назначена диета с дефицитом калорий 800 калорий в день
• 2-часовой OGTT выполнялся каждые 6 месяцев

Первичный результат: Время до развития диабета 2 типа и изменение массы тела через 4 года

Результаты

Выводы: По сравнению с одним лишь изменением образа жизни орлистат в сочетании с изменением образа жизни привели к большему снижению заболеваемости диабетом 2 типа в течение 4 лет и к большей потере веса в клинически репрезентативной популяции с ожирением.Разница в заболеваемости диабетом была обнаружена только в подгруппе с нарушенной толерантностью к глюкозе; потеря веса была аналогичной у субъектов с нарушенной толерантностью к глюкозе или нормальной толерантностью к глюкозе.

• Сводка
• Орлистат, по-видимому, имеет умеренный эффект в предотвращении диабета у пациентов с непереносимостью глюкозы. Эффект скорее всего из-за похудания
• См. исследований по профилактике диабета 2 типа для полного обзора исследований по профилактике диабета

• Желудочно-кишечные (ЖКТ) побочные эффекты
• Поскольку орлистат блокирует всасывание жира, он может вызывать неприятные
  Побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта
• Побочные эффекты имеют тенденцию уменьшаться со временем
• На вкладыше к упаковке орлистата указано, что примерно 50% стороны GI
  эффекты длятся менее 1 недели, а большинство длятся не более 4 недель
• Побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта усиливаются при приеме орлистата.
  с жирной пищей

• Мальабсорбция витаминов
• Всасывание жирорастворимых витаминов A, D, E, K и бета-каротина
  (предшественник витамина А) снижается на орлистате
• Пониженное всасывание обычно не приводит к дефициту витаминов.
  [8,10]
• По окончании пробной версии XENDOS ,
  наблюдалось значительное снижение всех четырех жирорастворимых витаминов в
  группу орлистата по сравнению с группой плацебо.Однако средний
  уровень витаминов оставался в пределах нормы для группы орлистата
  все время в течение четырехлетнего испытания. Пациентов в испытании не было.
  Поручили принять витаминную добавку. [8]
• Рекомендация производителя
• Производитель орлистата рекомендует пациентам принимать поливитамины с жирорастворимыми витаминами A, D, E и K один раз в день во время приема орлистата
• Витамин следует принимать не менее чем за 2 часа до или после приема орлистата [10]

• Травма печени
• По данным постмаркетингового наблюдения, 13 случаев печеночной недостаточности (1 с Alli®
  и 12 с Ксеникалом®) были зарегистрированы
• Двенадцать случаев произошли в зарубежных странах, один произошел в
  U.С.
• В некоторых случаях пациенты принимали другие препараты, которые могут повредить
  печень
• Приблизительно 40 миллионов человек во всем мире использовали орлистат
• FDA исследовало данные и не нашло существенных доказательств того, что
  орлистат вызывает повреждение печени [13]

• Почечная токсичность
• Орлистат может косвенно повредить почки через гипероксалурию. Оксалат — конечный продукт метаболизма человека.Он также содержится в продуктах питания и всасывается из кишечника при употреблении.
  Когда оксалат в кишечнике не связан с кальцием, он легче всасывается.
• Орлистат блокирует всасывание жира и увеличивает количество жира в просвете. Люминальный жир связывает кальций и снижает его способность связывать оксалаты. Больше оксалата всасывается, а более высокие концентрации выводятся почками.
• Были случаи нефропатии и почечной недостаточности из-за гипероксалурии, вызванной орлистатом.Пациентам с риском почечной недостаточности следует соблюдать осторожность при приеме орлистата. [10,16]
• Гипероксалурия также может способствовать образованию камней в почках (см. Ниже)

• Камни в почках
• Орлистат может косвенно способствовать образованию камней в почках посредством гипероксалурии. Оксалат — конечный продукт метаболизма человека. Он также содержится в продуктах питания и всасывается из кишечника при употреблении.Когда оксалат в кишечнике не связан с кальцием, он легче всасывается.
• Орлистат блокирует всасывание жира и увеличивает количество жира в просвете. Люминальный жир связывает кальций и снижает его способность связывать оксалаты. Больше оксалата всасывается, а более высокие концентрации выводятся почками.
• Повышение концентрации оксалата в моче может увеличить риск
  камни в почках у восприимчивых людей
• Пациентам с камнями в почках из оксалата кальция в анамнезе может потребоваться:
  избегать орлистата [10,14]

• Беременность
• Пациенты с синдромом хронической мальабсорбции
• Больные холестазом

• Болезнь почек
• Производитель заявляет, что орлистат не изучался у пациентов с
  тяжелое заболевание почек
• В кровоток всасывается минимальное количество орлистата
• Не ожидается, что заболевание почек повлияет на выведение [10]
• Орлистат может вызвать гипероксалурию, которая может вызвать повреждение почек и камни в почках

• Болезнь печени
• Производитель заявляет, что орлистат не изучался у пациентов с
  значительное заболевание печени
• В кровоток всасывается минимальное количество орлистата
• Не ожидается, что заболевание печени повлияет на его выведение [10]

• Синдромы мальабсорбции
• Пациенты с синдромами мальабсорбции (напр.хронический панкреатит,
  укороченный кишечник, глютеновая спру) не следует принимать орлистат [10]

• Холестаз (заболевание желчного пузыря)
• Пациентам с заболеваниями желчного пузыря нельзя принимать орлистат [10]

• ПРИМЕЧАНИЕ: Лекарство
  представленные здесь взаимодействия НЕ являются исчерпывающими. Другие взаимодействия могут
  существовать. Представленные здесь взаимодействия предназначены для того, чтобы
  прописанные лекарства и / или взаимодействия, которые хорошо задокументированы.Всегда
  Перед одновременным приемом лекарств проконсультируйтесь с врачом или фармацевтом.
  НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ для получения дополнительной информации о лекарственных взаимодействиях.
• Орлистат
• Амиодарон (Кордарон®) — Орлистат снижает абсорбцию амиодарона на 23–27% [15]
• Противоэпилептические средства — Сообщалось о судорогах у пациентов, принимавших орлистат с противоэпилептическими средствами.Внимательно следите за уровнем наркотиков и / или частотой приступов у пациентов, принимающих орлистат с противоэпилептическими средствами.
• Антиретровирусные (ВИЧ) препараты — Сообщалось о потере вирусологического контроля у пациентов с ВИЧ, которые принимали орлистат с антиретровирусными препаратами, такими как атазанавир, ритонавир,
  тенофовир дизопроксил фумарат, эмтрицитабин и комбинации лопинавир / ритонавир и эмтрицитабин / эфавиренз / тенофовир дизопроксил фумарат. При одновременном приеме орлистата с антиретровирусными препаратами необходимо внимательно следить за вирусной нагрузкой ВИЧ.Прекратите прием орлистата при увеличении вирусной нагрузки ВИЧ.
• Циклоспорин (Неорал®) — Орлистат может снижать абсорбцию циклоспорина. Циклоспорин следует принимать через 3 часа после орлистата. Следует контролировать уровень циклоспорина. [10]
• Жирорастворимые витамины (A, D, E, K) — Орлистат может снижать всасывание жирорастворимых витаминов. Пациентам, принимающим орлистат, следует принимать добавки с витаминами A, D, E,
  и K (см. выше ).Добавку следует принимать за 2 часа до или после приема орлистата.
  принято
• Лекарства на гормоны щитовидной железы (левотироксин, Synthroid®, Levoxyl®) — Орлистат может влиять на абсорбцию гормонов щитовидной железы. Орлистат и препараты для лечения щитовидной железы следует принимать с интервалом в 4 часа и контролировать уровни щитовидной железы [10]
• Варфарин (Coumadin®) — Орлистат может подавлять абсорбцию витамина К, что может усиливать действие варфарина.Пациенты, которые начинают орлистат одновременно с варфарином, должны тщательно контролировать уровень МНО. [10]

• Метаболизм и клиренс
• Лишь небольшое количество орлистата всасывается в кровоток
• Поглощенное количество не имеет значения [10]

• Xenical® был одобрен FDA в 1999 г.
• Alli® продается без рецепта с 2007 г.
• В исследовании XENDOS было обнаружено, что орлистат 120 мг три раза в день
  безопасный сроком на четыре года [8]
• Орлистат принимали миллионы людей и, по всей видимости,
  в целом безопасно

• Лекарственные формы
• Ксеникал® 120 мг капсулы
• Алли®, капсула 60 мг (продается без рецепта)
• Дозирование
• Xenical®
• Дозировка: 120 мг 3 раза в сутки
• Макс: 120 мг 3 раза в день
• Принимать во время или в течение 1 часа после еды
• Если еда не содержит жиров, дозу можно пропустить
• Alli®
• Дозировка: 60 мг 3 раза в день
• Макс: 60 мг 3 раза в день
• Принимать во время или в течение 1 часа после еды
• Если еда не содержит жиров, дозу можно пропустить
• Прочие
• Ежедневно принимать поливитамины, содержащие витамины A, D, E и K, с орлистатом
• Принимать витамин за 2 часа до или после орлистата
• Общий / Цена
• Xenical® — Нет универсального.Стоит более 150 долларов в месяц.
• Alli® — Нет универсального. Стоит менее 50 долларов в месяц.

• 1 — PMID 15266516
• 2 — PMID 18006966
• 3 — PMID 20301983
• 4 — PMID 18362248
• 5 — PMID 18200802
• 6 — PMID 17404856
• 7 — PMID 171
• 8 — PMID 146
• 9 — PMID 10678259
• 10 — Вкладыш в упаковку Xenical®
• 11 — PMID 166
• 12 — PMID 16630771
• 13 —
  Веб-сайт FDA
• 14 — PMID 180
• 15 — PMID 12723464
• 16 — PMID 318 — Когда причина не совсем ясна, NEJM (2020)

Лекарственные растения и их ингибирующая активность в отношении липазы поджелудочной железы: обзор

Ожирение признано одним из основных нарушений образа жизни, особенно в развивающихся странах, и оно с угрожающей скоростью распространяется в странах нового мира из-за потребления фаст-фуда, индустриализации и т.д. и снижение физической активности.Кроме того, это связано с огромным количеством хронических заболеваний и инвалидностей. На сегодняшний день относительно эффективные лекарства из натуральных или синтетических источников обычно связаны с серьезными побочными эффектами, часто приводящими к прекращению клинических испытаний или даже к изъятию из продажи. Чтобы найти новые соединения, которые являются более эффективными или с меньшими побочными эффектами по сравнению с орлистатом, лекарством, одобренным для лечения ожирения, новые соединения, выделенные из натуральных продуктов, идентифицируются и проверяются на эффекты против ожирения, в частности, на липазу поджелудочной железы. ингибирующий эффект.Активность ингибирования липазы поджелудочной железы широко используется для определения потенциальной эффективности натуральных продуктов в качестве средств против ожирения. В попытках найти натуральные продукты для борьбы с ожирением все больше исследований было сосредоточено на выявлении новых ингибиторов панкреатической липазы с менее неприятными побочными эффектами. В этом обзоре мы рассматриваем потенциальную роль растений, которые были исследованы на предмет их ингибирующей активности панкреатической липазы.

1. Введение

Ожирение, получившее название «Синдром Нового Света», в настоящее время считается Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) глобальной проблемой и связано с огромным количеством хронических заболеваний и инвалидностей, таких как дислипидемия, жировая болезнь печени, остеоартрит, гипертония, обструктивное апноэ во сне, камни в желчном пузыре, диабет 2 типа, рак репродуктивной системы и желудочно-кишечного тракта, ишемическая болезнь сердца, сердечная недостаточность и инсульт [1, 2].Кроме того, недавно было заявлено, что он способствует развитию рака груди (у женщин в постменопаузе), а также рака эндометрия, толстой / прямой кишки, поджелудочной железы, почек, пищевода, желчного пузыря, печени и простаты [3, 4].

Ожирение в настоящее время признано основным расстройством образа жизни, особенно в развивающихся странах, и оно с угрожающей скоростью распространяется в странах нового мира из-за потребления фаст-фуда, индустриализации и снижения физической активности [5]. По данным ВОЗ, ожирение убивает больше людей, чем недостаточный вес, а 65% населения, проживающего в развитых странах, имеет избыточный вес [6].Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ, 2014) сообщила, что более 1,4 миллиарда взрослых в возрасте 20 лет и старше имели избыточный вес, из них почти 300 миллионов женщин и более 200 миллионов мужчин страдали ожирением [7]. Сообщается, что в Соединенных Штатах около одной трети взрослого населения страдает ожирением, и это считается важной причиной смерти людей [8]. В 2013 году сообщалось, что в развивающихся странах, таких как Малайзия, около 44% взрослых мужчин в возрасте 20 лет и старше имели избыточный вес и около 12% страдали ожирением.Показатели выше даже среди женщин: около 49% взрослых женщин в возрасте 20 лет и старше имели избыточный вес и около 17% страдали ожирением [9]. Ожирение считается чрезвычайно дорогостоящей проблемой здравоохранения, на которую в развитых странах приходится 2–6% общих затрат на здравоохранение [10].

Многие лекарства использовались для профилактики и лечения ожирения на протяжении многих лет. Однако, несмотря на кажущееся неизбежным прогрессирование этого заболевания и многообещающие результаты применения некоторых лекарств в снижении массы тела и коррекции многочисленных кардиометаболических факторов, в последние несколько лет большинство одобренных и продаваемых на рынке препаратов против ожирения было снято с рынка из-за к серьезным побочным эффектам [11].В 2000 г. Европейское агентство по лекарственным средствам (EMA) отозвало фентермин, препарат для подавления аппетита, принадлежащий к семейству β -фенэтиламина, из-за нежелательного соотношения риска и пользы [11, 12]. Кроме того, мазиндол и диэтилпропион (амфетаминоподобные аналоги) были отозваны EMA в 2000 году [12]. Римонабант, препарат, подавляющий аппетит, является первым селективным блокатором рецепторов каннабиноида-1 (CB1), а рецептор CB1 играет роль в регуляции поведения, связанного с аппетитом.В 2008 году использование римонабанта было приостановлено EMA из-за повышенного риска психических побочных эффектов, таких как тревожность, суицидальные мысли, нарушения сна и депрессия. Это средство для подавления аппетита было доступно в 56 странах с 2006 г., но оно никогда не было одобрено Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) [13].

В 1997 году сибутрамин, который является аноректическим средством или средством для подавления аппетита, селективным ингибитором обратного захвата норадреналина / серотонина, широко использовался после одобрения FDA.В октябре 2010 года FDA отозвало его с рынка из-за связи с повышенным риском серьезных нефатальных сердечно-сосудистых событий, таких как инсульт и инфаркт миокарда [14]. Впоследствии в 2010 г. ЕМА также предложила приостановить прием сибутрамина [14]. Общие побочные эффекты сибутрамина возникают из-за активации симпатической нервной системы, например бессонницы, сухости во рту, запоров, анорексии, головной боли, сердцебиения и гипертонии [15].

В настоящее время только орлистат (ксеникал), препарат, который, как считается, действует путем ингибирования фермента липазы поджелудочной железы, ключевого фермента переваривания пищевых триглицеридов, был одобрен FDA и доступен для длительного лечения ожирения.Орлистат является ингибитором липаз желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы, который способен предотвращать всасывание примерно 30% пищевых жиров [16]. Орлистат — насыщенное производное липстатина (выделено из грамположительной бактерии Streptomyces toxytricini ) [17]. Помимо своей активности против ожирения, он также может незначительно снижать артериальное давление, предотвращать развитие диабета 2 типа и улучшать пероральную толерантность к глюкозе. В 1998 году он был одобрен и считается единственным существующим препаратом для длительного контроля ожирения.Механизм ингибирования липазы орлистатом заключается в ковалентном связывании с серином активного центра липазы [18].

Несмотря на многообещающие результаты применения орлистата в лечении ожирения, он связан с некоторыми неприятными побочными эффектами со стороны желудочно-кишечного тракта [19]. Эти побочные эффекты являются следствием механизма действия орлистата, и наиболее важными побочными эффектами являются метеоризм, жидкий стул, диарея, масляные кровянистые выделения, недержание мочи или позывы к фекалиям и спазмы в животе [20]. Из-за побочных эффектов орлистата он может плохо переноситься.Следовательно, крайне важно открыть новые ингибиторы, полученные из природных источников, особенно из растений, которые не связаны с этими серьезными побочными эффектами.

Несколько стратегий были применены для разработки средств против ожирения, включая увеличение расхода энергии (путем блокирования адипогенеза или индукции липолиза с последующим окислением жиров) и снижения потребления энергии (путем подавления аппетита и задержки или ингибирования всасывания пищи). В этом обзоре мы рассматриваем потенциальную роль растений в качестве агентов против ожирения путем изучения их способности ингибировать липазу поджелудочной железы.

2. Регулирование аппетита

Ограничение аппетита считается первой линией в лечении ожирения [21]. Регулирование массы тела посредством контроля аппетита действует как многофакторное действие, являющееся результатом гормональной и неврологической взаимосвязи. Хорошо известно, что активность дофамина, гистамина, серотонина и связанных с ними рецепторов коррелирует с регуляцией насыщения [22].

Сложная регуляция аппетита и насыщения человека состоит из почти 40 орексигенных и анорексигенных гормонов, ферментов, нейропептидов, других сигнальных молекул клетки и их рецепторов [23].Сигнальные молекулы голода и насыщения вырабатываются в головном мозге (центрально) и в печени, пищеварительном тракте и жировой ткани (периферически) [24]. Дугообразное ядро ​​гипоталамуса (ARC) считается наиболее важной областью мозга, которая играет ключевую роль в регуляции аппетита. Аппетит в краткосрочной перспективе может регулироваться нервными и эндокринными сигналами из желудочно-кишечного тракта, в то время как информация об уровне ожирения и остром нутритивном статусе от периферических гормонов может приниматься и транслироваться ARC и нейронами ствола мозга [25].

Известно, что некоторые вещества, такие как бета-адренергические агонисты, усиливают окисление жирных кислот в печени и снижают произвольное потребление пищи у крыс [26]. Считается, что в печени энергетический статус, в основном за счет выработки АТФ, активирует сигналы, поступающие через сенсорные нейроны блуждающего нерва в центры мозга, регулирующие аппетит [27]. Соответственно, как только окисление жирных кислот в печени снижается, одновременно происходит снижение уровня АТФ, что затем усиливает аппетит. Более того, ингредиенты, которые усиливают окисление жирных кислот печени, такие как потребление масла 1,3-диацилглицерида и жирных кислот со средней длиной цепи, приводят к снижению потребления пищи у людей [28].

Механизм подавления аппетита в головном мозге обычно связан с воздействием на центры контроля голода и связан с чувством сытости. Однако сокращение потребления пищи может увеличить секрецию грелина в желудке животных и людей, что приводит к стимуляции повышенного потребления. Таким образом, антагонизм к грелину может снижать или притуплять повышенный аппетит, который, возможно, происходит при ограниченном питании, и, следовательно, может считаться важной мишенью для лечения ожирения [29].Кроме того, антагонизм к рецепторам меланин-концентрирующего гормона (MCH) также можно рассматривать как потенциальную мишень для лечения ожирения посредством регуляции аппетита.

Более того, синтаза жирных кислот (FAS) является единственным белком в геноме человека, продуцируемым из ацетилкофермента А и малонил-КоА, который, как известно, катализирует восстановительный синтез длинноцепочечных жирных кислот. Данные показывают, что ингибирование FAS у мышей, получавших ингибиторы FAS, приводит к снижению потребления пищи и, следовательно, снижению массы тела.Следовательно, подавление FAS может быть потенциальной терапевтической мишенью для подавления аппетита, тем самым вызывая потерю веса [30].

3. Ингибиторы адипогенеза

Адипоциты, также известные как жировые клетки и липоциты, играют значительную роль в контроле энергетического баланса и гомеостаза липидов, сохраняя триглицериды и высвобождая свободные жирные кислоты в ответ на изменение потребности в энергии [31] . С другой стороны, их длительное увеличение потребления связано с прогрессированием ожирения и приводит к серьезным сопутствующим заболеваниям [32].Следовательно, масса и размер ожирения являются важными маркерами ожирения. Существует два типа ожирения, при которых первый возникает из-за увеличения количества адипоцитов (гиперплазия), а второй — увеличения объема адипоцитов (гипертрофический). Гиперплазия сильнее коррелирует с тяжестью ожирения и наиболее выражена у людей с тяжелым ожирением. Однако гипертрофия в определенной степени характерна для всех людей с избыточным весом и ожирением [33]. Подобно жировой ткани и мышцам, периферические ткани отвечают за производство энергии и метаболизм питательных веществ, тогда как центральная нервная система (ЦНС), особенно гипоталамус, объединяет и регулирует расход энергии и потребление пищи [34].Лечение, которое приводит к регулированию количества и размера адипоцитов и выражению сигналов, связанных с энергетическим балансом, а также к усилению или ингибированию особых адипокинов, было предложено для проявления биоактивности, связанной с ожирением. С другой стороны, результаты последних исследований показали, что ингибирование жировой ткани или увеличение адипогенеза связано с диабетом 2 типа и другими метаболическими нарушениями, такими как атеросклероз [35].

4. Ингибирование всасывания жира

Переваривание и всасывание питательных веществ должно быть уменьшено, чтобы снизить потребление энергии.Поскольку жир способствует отложению нежелательных калорий в большей степени, чем белок или углеводы, подавление всасывания жира можно считать наиболее распространенной целью снижения потребления энергии. Среди существующих методов лечения ожирения разработка ингибиторов переваривания и всасывания питательных веществ считается важной стратегией в усилиях по снижению потребления энергии через желудочно-кишечные механизмы [36]. Ингибирование переваривания и всасывания пищевых липидов за счет ингибирующего действия на липазу поджелудочной железы может быть нацелено на разработку средств против ожирения [37].

Липаза поджелудочной железы (триацилглицерин ацилгидролаза), которая катализирует переваривание пищевых триглицеридов, является важным липолитическим ферментом, который синтезируется и секретируется через поджелудочную железу. У человека липаза поджелудочной железы (PL), кодируемая геном PNLIP, играет важную роль в абсорбции триацилглицерина с пищей, гидролизуя триацилглицерины до моноацилглицеринов и жирных кислот [38]. Он отвечает за гидролиз 50–70% всех пищевых жиров и секретируется в двенадцатиперстную кишку через систему протоков поджелудочной железы [36].Ацинарные клетки поджелудочной железы секретируют липазу поджелудочной железы, и этот фермент высвобождает жирные кислоты из триглицеридного скелета в положениях C-1 и C-3. Эти жирные кислоты включаются в мицеллы желчных кислот и фосфолипидов и далее абсорбируются на уровне щеточной каймы тонкой кишки, чтобы в конечном итоге попасть в периферическое кровообращение в виде хиломикронов. Вмешательство в гидролиз жира приводит к снижению использования липидов, поступающих с пищей; следовательно, ингибирование липазы снижает всасывание жира.

5.Ингибиторы панкреатической липазы из натуральных продуктов

Свойства ингибиторов панкреатической липазы были всесторонне исследованы для определения потенциального эффекта натуральных продуктов в качестве средств против ожирения. В связи с огромным успехом натуральных продуктов для лечения ожирения, больше исследований было сосредоточено на выявлении новых ингибиторов панкреатической липазы с менее неприятными побочными эффектами. До сих пор сообщалось о многих натуральных продуктах (растительных экстрактах и ​​изолированных соединениях) с их способностью ингибировать панкреатическую липазу, включая протамин [39], ε -полилизин [40], полисахариды, такие как хитозан [41], пищевые волокна из пшеничных отрубей и холестирамин [42], соевые белки [43] и синтетические соединения.Краткое описание лекарственных растений как потенциальных агентов против ожирения с ингибирующей активностью панкреатической липазы, о которых сообщается в этом обзоре, представлено в таблице 1.

Sahib et al. [44] оценили антипанкреатическую липазную активность in vitro этанольного экстракта центеллы азиатской , Morinda citrifolia и Momordica charantia (плоды) в различных концентрациях (7.81–250 частей на миллион) с использованием орлистата и эпикатехина в качестве синтетического и природного положительного контроля соответственно. Растительные экстракты Morinda citrifolia , Momordica charantia, и плодов Centella asiatica ингибировали активность липазы поджелудочной железы с ингибированием, и% соответственно.

Bustanji et al. [45] проверили метанольные экстракты 23 традиционных лекарственных растений, принадлежащих 15 семействам, на предмет их антипанкреатической липазной активности, независимо от их заявленного этнофармакологического использования.Эти растения были собраны в нескольких районах Иордании. Ингибирование активности липазы поджелудочной железы экстрактами растений (12,5, 25, 50 и 200 мкг / 1084 мкг / мл) и орлистата (положительный контроль) измеряли с помощью спектрофотометрического анализа. Тринадцать растительных экстрактов ингибировали дозозависимую дозу, с диапазоном IC ₅₀ от 108 до 938 мк мкг / мл, в том числе Anthemis palestina Boiss. (107,7 μ г / мл), Salvia spinosa L.(156,2 μ г / мл), Ononis natrix L. (167 μ г / мл), Fagonia arabica L. (204,1 μ г / мл), Origanum syriaca (L.) (234 μ г / мл), Hypericum triquetrifolium Turra. (236,2 μ г / мл), Malva nicaeensis Все. (260,7 μ г / мл), Chrysanthemum coronarium L. (286,1 μ г / мл), Paronychia argentea Lam. (342,7 μ г / мл), Convolvulus althaeoides L.(664,5 μ г / мл), Reseda alba L. (738 μ г / мл) и Adonis palaestina Boiss. (937,5 мк г / мл). Положительный контроль, орлистат, показал значение IC ₅₀ , равное 0,65 мк мкг / мл.

Ado et al. [46] оценили антилипазную активность сырых метанольных экстрактов различных частей (листьев, плодов, корней, семян, стеблей и цветов) 98 растений из Малайзии, считающихся травяными или водными. Полученные результаты показали, что 19.4% экстрактов проявляли антилипазную активность более 80%, в то время как 22,4% демонстрировали умеренное ингибирование (41–80%) и 2% были нейтральными по отношению к активности липазы поджелудочной железы свиней (PPL). Результаты показали, что листья Cynometra cauliflora ( nam-nam ), спелые плоды Averrhoa carambola , листья Aleurites moluccana (L.) Willd. (орех свечи / buah keras ) и плоды Archidendron jiringa (Jack) Nielsen L. показали наивысшую антилипазную активность (100%) и эквивалентны 0.11 мкг г орлистата / мл. Орлистат в концентрации 0,1 9 · 1083 мк · 9 · 1084 мкг / мл показал 95% ингибирование активности липазы поджелудочной железы.

Adisakwattana et al. [47] оценили ингибирующую активность водного экстракта различных частей 9 съедобных растений в отношении липазы поджелудочной железы in vitro , используя орлистат в качестве положительного контроля. Полученный результат показал, что Ginkgo biloba (гинкго) и Morus alba (шелковица) проявляли многообещающую ингибирующую активность против липазы поджелудочной железы.Среди растений экстракт шелковицы считался наиболее эффективным ингибитором липазы поджелудочной железы, тогда как экстракт Cassia angustifolia (сенна) считался наименее сильным ингибитором с IC ₅₀ и мг / мл соответственно. С другой стороны, все экстракты были менее сильными ингибиторами по сравнению с орлистатом с IC ₅₀ мг / мл.

Kim et al. [48] ​​проверили 115 экстрактов травяного этанола на предмет ингибирующей активности липазы поджелудочной железы свиньи in vitro .Среди 115 изученных видов растений восемнадцать экстрактов показали значения IC ₅₀ менее 50 μ г / мл, и три экстракта этих растений, а именно: Solidago serotina (целое растение), Acer mono (ветви и листья) и Cudrania tricuspidata (листья), показали значения IC ₅₀ менее 10 мк г / мл. Примечательно, что Cudrania tricuspidata показал значение IC ₅₀ , равное 9,91 мк г / мл. Затем было исследовано ингибирующее действие на панкреатическую липазу этанольного экстракта листьев Cudrania tricuspidata (50 и 250 мг / кг) in vivo .Полученные результаты показали, что Cudrania tricuspidata (50 мг / кг) снижает уровни триацилглицерина в плазме, а растительный экстракт в самой высокой концентрации (250 мг / кг) значительно задерживает всасывание липидов; однако эти эффекты были слабее, чем у орлистата (положительный контроль).

Lai et al. [49] провели скрининг липазо-ингибирующей активности метанольных экстрактов различных частей 32 выбранных лекарственных растений в Малайзии с использованием липазы поджелудочной железы свиней и п-нитрофенилбутирата в анализе in vitro .Из тридцати двух экстрактов двадцать семь сырых экстрактов проявили ингибирующую активность против липазы поджелудочной железы свиньи in vitro . Eleusine indica продемонстрировал наивысший ингибирующий эффект против липазы поджелудочной железы (%) по сравнению с орлистатом (%). Кроме того, умеренную активность проявили Myristica Fragrans (mace, 18–20%), Melastoma Candidum 20%, Phyla nodiflora 18% и Dicranopteris linearis 14%. С другой стороны, девятнадцать сырых экстрактов проявляли слабую ингибирующую активность (<10%) против PL.

Conforti et al. [50] проверили ингибирующую активность липазы поджелудочной железы у 18 видов съедобных растений, отслеживая гидролиз п-нитрофенилкаприлата (п-NPC), который высвобождает желтый хромоген, p -нитрофенол. Среди исследованных двенадцать экстрактов показали значение IC ₅₀ более 10 мг / мл: Asparagus acutifolius , Silene vulgaris , Origanum vulgare , Raphanus raphanistrum , Smyrnium , Sonnium olusatrum Foeniculum vulgare , Cichorium intybus , Papaver rhoeas, и Anchusa azurea , тогда как девять экстрактов показали значение IC ₅₀ менее 10 мг / мл.Орлистат в конечной концентрации 18 мг / мл был протестирован для сравнения ингибирующей активности. Данные показали, что среди растительных экстрактов экстракты, относящиеся к Lamiaceae ( Rosmarinus officinalis и Mentha spicata ), проявляли ингибирующую активность со значениями IC ₅₀ 7,00 мг / мл и 7,85 мг / мл соответственно. Среди всех экстрактов растений, относящихся к сложноцветным, только Sonchus oleraceus проявил ингибирующую активность (значение IC ₅₀ 9,75 мг / мл).Экстракт из Diplotaxis tenuifolia , принадлежащего к Brassicaceae, проявлял ингибирующую активность со значением IC ₅₀ , равным 7,76 мг / мл. Кроме того, водно-этанольные экстракты Portulaca oleracea (листья) показали самую высокую ингибирующую активность в отношении липазы со значением IC ₅₀ 5,48 мг / мл.

Zheng et al. [51] провели скрининг липазо-ингибирующей активности метанольных экстрактов различных частей 37 традиционных китайских лекарственных трав (0,2 мг / мл) против PPL in vitro с использованием спектрофотометрии с 2,4-динитрофенилбутиратом.Из 37 изученных экстрактов растений шесть проявили антилипазную активность от умеренной до сильной, более 30%. Prunella vulgaris L. (Labiatae) и Rheum palmatum L. (Polygonaceae) показали самый высокий ингибирующий эффект против PPL — 74,7% и 53,8% соответственно. Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. (Polygonaceae), Uncaria macrophylla Wall. (Alismataceae), Salvia miltiorrhiza Bge. (Labiatae) и Millettia reticulata Benth.(Leguminosae) проявляли умеренную активность — 30-40%. Результат ингибирующего действия Rheum palmatum L. и Prunella vulgaris L. в различных концентрациях выявил усиление ингибирующей активности при увеличении концентрации с 5 до 200 мк г / мл.

Toma et al. [52] исследовали ингибирующую активность спиртового экстракта листьев Moringa stenopetala на липазу поджелудочной железы с помощью спектрофотометрического анализа. Растительный экстракт незначительно ингибировал липазу поджелудочной железы со значением IC ₅₀ более 5 мг / мл.

Teixeira et al. [53] изучали ингибирующую активность гидроэтанольного экстракта листа Passiflora nitida Kunth (1, 10 и 100 мк г / мл) на липазу поджелудочной железы с помощью спектрофотометрического анализа с использованием орлистата в качестве положительного контроля. Экстракт Passiflora nitida в наивысшей концентрации (100 μ мкг / мл) показал (%) ингибирование панкреатической липазы, а орлистат продемонстрировал ингибирование (%) при 1,6 μ г / мл. Значения IC ₅₀ для ингибирования липазы поджелудочной железы для экстракта Passiflora nitida и орлистата составляли и ( мкл, г / мл), соответственно.

Marrelli et al. [54] провели скрининг липазо-ингибирующей активности водно-спиртовых экстрактов пяти видов съедобных растений из региона Калабрия (Италия) против PPL in vitro с использованием орлистата (20 мкл мкг / мл) в качестве контроля. Активность липазы измеряли путем мониторинга гидролиза p-NPC. Clematis vitalba L. и Lepidium sativum L. показали наивысшую ингибирующую активность в отношении липазы поджелудочной железы со значением IC ₅₀ и мг / мл, соответственно.Следовательно, экстракты Clematis vitalba можно считать хорошим кандидатом для дополнительных исследований по выделению ингибиторов панкреатической липазы.

Ekanem et al. [55] исследовали ингибирование липазы поджелудочной железы этаноловыми экстрактами Aframomum melegueta (семена) и Spilanthes acmella (цветочные почки) в концентрациях 0,75–2,0 мг / мл с использованием анализа in vitro . A. melegueta и S. acmella (2 мг / мл) показали активность ингибирования липазы 90% и 40% соответственно.

Kumar et al. [56] проверили ингибирующую липазную активность различных частей 33 лекарственных растений из Индии (экстракты н-гексана, дихлорметана, метанола и этилацетата) in vitro . Среди 33 исследованных растительных экстрактов этанольный экстракт корней Cassia siamea (250 мк г / мл) показал самое высокое ингибирование панкреатической липазы в%. Кроме того, дихлорметановый экстракт плодов Lagerstroemia indica показал% ингибирования, а этилацетатный экстракт листьев и коры Chukrasia tabularis показал% и% ингибирования, соответственно.Точно так же этанольный экстракт корней Vigna radiata , плодов L. indica , цельного растения Justicia gendarussa и смолы Ferula asafoetida показал%,%,% и% ингибирования PL соответственно. Метанольный экстракт цветков Ixora chinensis также показал% ингибирования ферментов.

Скрининг этанольных экстрактов 400 растений (100, 50, 25, 10, 5, 2,5 и 1,25 мк г / мл) с использованием анализа липазы поджелудочной железы свиней in vitro привел к идентификации нескольких экстрактов с потенциальная активность против PPL.Из отобранных экстрактов 44 экстракта в концентрации 100 мкл г / мл продемонстрировали высокий антилипазный эффект при использовании 2,4-динитрофенилбутирата в качестве субстрата в анализе липазы поджелудочной железы свиней. Среди экстрактов четыре показали относительно высокую антилипазную активность более 30%. Плоды Rubi Fructus , Salicis Radicis Кора коры, Geranium nepalense целая трава и Плоды Cornus officinalis показали значительное ингибирование PPL с 32.5%, 34,8%, 38% и 31,4%, соответственно, по сравнению с орлистатом (100 мкг мкг / мл) в качестве положительного контроля с 42% [57].

Kaewpiboon et al. [58] проверили ингибирующую липазную активность 52 видов растений (этанол и водные экстракты) тайских лекарственных растений in vitro . Полученные данные показали, что из всех экстрактов только этанольный экстракт стеблей Coscinium fenestratum показал слабую ингибирующую активность липазы (значение IC ₅₀ 160 мк г / мл), которое имело 17.Значение IC ₅₀ в 3 раза ниже, чем у орлистата с μ г / мл.

Chompoo et al. [59] исследовали способность ацетонового экстракта из цветов, семян, листьев, околоплодников, стеблей и корневищ Alpinia zerumbet ингибировать липазу поджелудочной железы in vitro . Полученные данные показали, что экстракт семян (IC ₅₀ = мк мкг / мл) имел самый высокий ингибирующий эффект на активность PL среди всех различных частей.

Morikawa et al.[60] исследовали способность метанольного экстракта коры Shorea roxburghii ингибировать липазу поджелудочной железы in vitro . Полученный результат показал, что растительный экстракт ингибировал активность липазы поджелудочной железы с IC ₅₀ 31,6 мк мкг / мл по сравнению с орлистатом с IC ₅₀ 0,056 мк г / мл.

Ли и др. [61] проверили ингибирующее действие in vitro на липазу различных частей 61 лекарственного растения (в виде этанольного экстракта) из Кореи путем измерения гидролиза п-нитрофенилбутирата до п-нитрофенола.Среди 61 изученного растительного экстракта Sorbus commixta (лист, стебель) и Viscum album (целое растение) показали лучшую антилипазную активность со значениями IC ₅₀ 29,6 мг / мл и 33,3 мг / мл соответственно. Из проверенных экстрактов Camellia japonica (стебель, лист), Castanea crenata (тычиночный цветок) и Acer ginnala (плод) показали ингибирующую активность со значением IC ₅₀ 30–50 мг / мл. Однако он не был более эффективным, чем положительный контроль (орлистат) со значением 0 IC ₅₀ .076 мг / мл.

Raghavendra et al. [62] изучали ингибирующую активность в отношении липазы поджелудочной железы метанольного экстракта плодов околоплодника Artocarpus lakoocha (10, 100 и 1000 мг / мл) in vitro . Растительный экстракт ингибировал липазу поджелудочной железы дозозависимым образом, и наибольшее ингибирование (82,49%) наблюдалось при концентрации 1000 мг / мл.

de Souza et al. [63] исследовали действие препарата Baccharis trimera Less. листьев (этанол, метанол и водные экстракты) на ингибирование активности липазы поджелудочной железы in vitro .Водный и настоянный экстракты не проявляли ингибирующего действия на PL; однако метанольный экстракт значительно ингибировал активность PL на 78%, а этанольный экстракт показал низкое ингибирование только на 16%.

Иванов и др. [64] исследовали активность неочищенных водных этанольных экстрактов корневищ Bergenia crassifolia по ингибированию липазы поджелудочной железы в отношении липазы поджелудочной железы человека in vitro с использованием флюорометрического ридера для микропланшетов. Растительный экстракт ингибировал липазу поджелудочной железы человека со значением IC ₅₀ , равным 3.4 мк г / мл.

Yoshikawa et al. [65] исследовали влияние горячего водорастворимого экстракта из корней Salacia reticulata на ингибирование липазы поджелудочной железы и липопротеинлипазы из жировой ткани с использованием анализов in vivo и in vitro . Растительный экстракт ингибировал липазу поджелудочной железы и липопротеинлипазу (LPL) из жировой ткани со значением IC ₅₀ , равным 264 мг / мл и 15 мг / мл, соответственно. Растительный экстракт дозозависимо ингибировал LPL свиней и PL в адипоцитах крыс.

Moreno et al. [66] оценили активность липазы поджелудочной железы и липопротеинлипазы этанольного экстракта Vitis vinifera L. (виноградные косточки), используя анализ in vitro . Растительный экстракт дозозависимо ингибировал активность липазы поджелудочной железы. При концентрации 1 мг / мл он проявлял наивысший ингибирующий эффект в отношении липазы поджелудочной железы и липопротеинлипазы на 30% и 80% соответственно.

Moreno et al. [67] изучали ингибирующее действие этанольного экстракта арахиса ( Arachis hypogaea L.) скорлупы (шелуха, оболочки семян) на липопротеинлипазу и липазу поджелудочной железы человека с использованием анализов in vivo, и in vitro, . Растительный экстракт проявлял ингибирующую активность в отношении липазы поджелудочной железы в зависимости от дозы (1 мг / мл = 42% ингибирующего эффекта), а также оказывал умеренное ингибирующее действие на активность липопротеинлипазы. Кроме того, растительный экстракт может предотвратить увеличение массы тела, вызванное кормлением самцов крыс Wistar диетой с высоким содержанием жиров в течение 12 недель.

Adnyana et al. [68] оценили действие этанольного экстракта граната ( Punica granatum L.) листья с различными концентрациями при ингибировании липазы поджелудочной железы с использованием анализа in vitro . Растительный экстракт в концентрации 20,64 мк мкг / мл значительно подавлял активность липазы поджелудочной железы с IC ₅₀ на 50% по сравнению с орлистатом в качестве стандартного лекарственного средства с различными концентрациями.

Habtemariam [69] исследовал ингибирующие эффекты этанольного экстракта Cassia auriculata (надземные части) на липазу поджелудочной железы с использованием анализа in vitro .Растительный экстракт дозозависимо ингибировал липазу поджелудочной железы. Он показал ингибирующую активность против липазы поджелудочной железы со значением IC ₅₀ в мг / мл.

Han et al. [70] оценили ингибирующую активность липазы поджелудочной железы водного экстракта плодов Juglans mandshurica , используя анализ in vitro , измеряя скорость высвобождения олеиновой кислоты из триолеина. Растительный экстракт сильно ингибировал липазу поджелудочной железы в зависимости от дозы. Он ингибировал активность липазы поджелудочной железы со значением IC ₅₀ , равным 2.3 мг / мл.

Moreno et al. [71] исследовали ингибирующее действие этанольного экстракта мангового дерева ( Mangifera indica L.) (листья и кора стебля) на липазу поджелудочной железы, липопротеинлипазу и гормоночувствительную липазу с использованием тестов in vitro . Экстракты растений (кора стебля и листья) в концентрации 1 мг / мл показали значительное ингибирование липазы поджелудочной железы. Экстракт стволовой коры (1 мг / мл) снижал активность ЛПЛ на 75%. Растительный экстракт обеих частей снижал стимулируемый изопротеренолом липолиз в адипоцитах 3T3-L1.

Ono et al. [72] оценили влияние листьев Nelumbo nucifera (водный и этанольный экстракты) на ингибирование липазы поджелудочной железы с помощью анализов in vitro и in vivo . Растительные экстракты ингибировали активность липазы со значением IC ₅₀ 0,46 мг / мл и способствовали липолизу в адипоцитах 3T3-L1. Полученные результаты in vivo показали, что уровень триацилглицерина в плазме через 1 час после перорального введения липидной эмульсии крысам был значительно повышен и значительно снизился в группе, получавшей растительный экстракт.

Kurihara et al. [73] исследовали ингибирующее действие водного экстракта (листья) Cyclocarya paliurus на активность липазы поджелудочной железы. Растительные экстракты ингибировали активность липазы поджелудочной железы со значением IC ₅₀ , равным 9,1 мг / мл. Кроме того, экстракт (250 мг / кг) снижал уровни триацилглицерина в плазме у мышей при употреблении 5 мл / кг сала и оливкового масла.

Ким и Кан [74] проверили ингибирующий липазный эффект водных и этанольных экстрактов различных частей 19 выбранных лекарственных растений в Корее в анализе in vitro с помощью метода непрерывного мониторинга pH-Stat с использованием трибутирина в качестве субстрата.Среди девятнадцати исследованных растительных экстрактов Illicium Religiosum (древесина) и Juniperus communis (кора) показали самую высокую активность со значением IC ₅₀ 21,9 и 20,4 мк г / мл соответственно по сравнению с орлистатом. , со значением IC ₅₀ 0,750 мк г / мл. Между тем, Thuja orientalis (лист), Pyrus pyrifolia (кора и лист) и Euonymus alatus (корень) проявили эффект липазы поджелудочной железы с величиной IC ₅₀ 40–50 μ г / мл. .

Sharma et al. [75] исследовали антилипазную активность различных частей 75 лекарственных растений, принадлежащих к разным семействам, с помощью радиоактивного метода. Из всех протестированных экстрактов метанольные экстракты целой части трех растений, а именно Setaria italica (L.) Palib., Orixa japonica Thunb. И Eriochloa villosa (Thunb.) Kunth., Показали сильную активность антилипазы in vitro (более 80%).

Gholamhoseinian et al. [76] исследовали антилипазную активность метанольного экстракта 100 растений (различных частей) с помощью турбидиметрического анализа.Из протестированных экстрактов Quercus Infctoria (галлы), Eucalyptus galbie (листья), Rosa damascena (цветы) и Levisticum officinale (корни) показали антилипазную активность более 50%. С другой стороны, метанольные экстракты Myrtus communis (листья), Pistacia vera (плодовый зал), Carthamus oxyacantha (надземные части), Nigella sativa (семена), Trigonella foenum-graecum семена), Urtica urens (надземные части), Cinnamomum zeylanicum (дерма), Rheum ribes (корневища), Pimpinella anisum (семена), Ficus carica (листья), частей), Bunium persicum (семена), Arctium lappa (корни) и Otostegia persica (надземные части) проявляли ингибирующую активность в отношении липазы поджелудочной железы от 25 до 50%.

Kwon et al. [77] исследовали ингибирующее действие метанольного экстракта (корни) Dioscorea nipponica на активность липазы поджелудочной железы с использованием 4-MU олеата в качестве субстрата. Экстракты растений дозозависимо ингибировали активность липазы. Экстракт в концентрации 10 мкг мкг / мл (IC ₅₀ ) значительно ингибировал липазу поджелудочной железы с 50% ингибированием активности фермента по сравнению с орлистатом в качестве стандартного лекарственного средства с различными концентрациями.

6.Резюме

Несмотря на огромный рост заболеваемости ожирением за последние 25 лет, прогресс в открытии и разработке новых лекарств от ожирения весьма ограничен. Единственный одобренный препарат, орлистат, ингибитор липаз желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы, связан с некоторыми неприятными побочными эффектами со стороны желудочно-кишечного тракта. Следовательно, в поисках нетоксичных терапевтических препаратов, клинические продукты на растительной основе считаются альтернативным вариантом.

Поскольку лекарственные препараты не дали желаемых долгосрочных результатов, важно отметить, что в последние 10–20 лет началась повсеместная проверка с целью выяснения наиболее полезного источника новых природных соединений против ожирения и взять на себя нынешний относительный препарат сомнительной эффективности.За последние несколько лет возрос интерес к лекарственным травам, и около 500 различных видов растений используются в качестве основных ингредиентов, в то время как большинство из них все еще собирают в дикой природе [78]. В последние годы лечение, основанное на натуральных продуктах, и профилактика различных патологий были в центре внимания, и это видение постоянно распространяется по всему миру. В то же время были собраны доказательства и документация в поддержку огромных возможностей лекарственных растений, которые применялись в различных традиционных системах [79].По этой причине акцент на натуральных продуктах среди ученых рассматривается как подходящая альтернатива множеству лекарств, и многие считают, что натуральные продукты являются потенциальным источником новых химических веществ с потенциальной терапевтической эффективностью, учитывая, что традиционная медицина считается важный источник, который можно использовать для борьбы с различными заболеваниями, включая ожирение. В последнее время различные натуральные продукты и растения были оценены на предмет их потенциального эффекта против ожирения: in vivo и in vitro .Сегодня натуральные продукты, кажется, являются наиболее интересным источником современных лекарств и показали обнадеживающие результаты в борьбе с ожирением. Различные исследования выявили новые соединения и натуральные продукты, обладающие более сильным ингибирующим действием на ФЛ, по сравнению с орлистатом. Некоторые из этих растительных экстрактов показали сильное ингибирующее действие на переваривание жиров и богаты полифенолами, сапонинами и терпенами [37]. Многие природные ингибиторы панкреатической липазы проходят доклинические исследования; к сожалению, ни один из них не достиг клинического уровня.Фактически, иногда может быть очень сложно экстраполировать результаты исследований in vivo, или in vitro, на людей, поскольку во многих случаях они не были обнаружены как значительно эффективные. Таким образом, основным ограничением предыдущих исследований является то, что было показано, что большинство изучаемых соединений более эффективны, чем орлистат, но не было никаких клинических исследований, показывающих их побочные эффекты по сравнению с орлистатом.

В этой статье мы рассмотрели некоторые натуральные продукты, которые были исследованы как источники потенциальных молекул с ингибирующей активностью в отношении PL.Следовательно, для всех из них требуются согласованные усилия для определения активности, механизма действия и оптимальной необходимой дозы, а также их возможных токсических или побочных эффектов, чтобы назначить их в качестве новых средств против ожирения. В идеале такие исследования и исследования приведут к более эффективному и безопасному фармакологическому лечению ожирения.

Несомненно, существует огромная потребность в изучении лекарственных растений и их соединений в качестве терапевтического средства для борьбы с ожирением. Во всем мире существует огромное количество неизученных лекарственных растений, некоторые из которых традиционно использовались для контроля массы тела, в то время как лишь немногие из них когда-либо достигали стадии разработки лекарств из-за отсутствия научных и клинических данных фармакологии.Следовательно, для большинства из них было невозможно достичь стадии разработки лекарств, на которой можно было бы определить безопасность и эффективность лекарственных трав. Предлагается расширить исследования для выявления, выделения и сбора соединений, о которых сообщается, из растений, чтобы можно было тщательно осветить их эффективность и фармакологическую активность, особенно тех, которые используются в качестве приправ и специй, при лечении и преодолении ожирения у людей. Повышение знаний об использовании лекарственных препаратов против ожирения необходимо путем постоянного тестирования идентифицированных лекарственных растений на биологическую активность и токсичность, разработки коммерческих составов и стандартизации таких экстрактов [80].

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Выражение признательности

Авторы хотели бы поблагодарить Университет Малайи, Малайзия, за поддержку этого исследования грантом No. RG539-13HTM.

Какие лекарства из класса ингибиторов липазы используются для лечения инсулинорезистентности?

Эффекты против ожирения ингибитора липазы CT-II, экстракта съедобных трав, Nomame Herba, на крысах, получавших диету с высоким содержанием жиров

Приготовление CT-II

CT-II представлял собой фракцию водно-этанольного экстракта от Nomame Травы, содержащие в первую очередь проантоцианидин (конденсированный танин). Приготовление фракции было следующим: 800 г надземной части высушенного растения экстрагировали 10 л 50% этанола (4 л, 3 л, 3 л, три экстракции).Экстракт обрабатывали колонкой Diaion HP 20 (Mitsubishi Chemical Corporation), промывали 30% этанолом и элюировали 80% этанолом. Элюированный раствор упаривали и лиофилизировали досуха, затем получали 24 г порошка CT-II. Порошок CT-II использовали в виде смеси с экспериментальной диетой in vivo .

In vitro Ингибирующий эффект CT-II на активность липазы

Анализ активности липазы с использованием триглицерида в качестве субстрата проводили в соответствии с методом Fukumoto et al . ¹⁰ Вкратце, ингибирующий эффект (pH 7,4) и 1 мл 50% раствора CT-II в тетрагидрофуране (THF) смешивали в пробирке L-типа (φ18 × 120 мм) и 1 мл раствора липазы поджелудочной железы свиньи (Sigma type-II, 0,71 мг / мл в виде белка в буфере McIlvaine) и инкубировали при 37 ° C в течение 15 мин при встряхивании. Реакцию останавливали добавлением этанола, и высвободившиеся жирные кислоты титровали 0,05 М NaOH. Бланк измеряли с использованием 50% THF без CT-II (эксперимент 1).

In vivo эффекты CT-II на массу тела, телесный жир и метаболиты

Животные и диета.

В исследовании использовали самок крыс линии Sprague – Dawley. Их содержали в индивидуальных клетках из нержавеющей стали при контролируемой температуре (24 ± 2 ° C) и 12-часовом цикле свет-темнота со свободным доступом к воде и порошкообразной диете с высоким содержанием жиров, содержащей 60% жира, 7,5% углеводов, 24,5%. белок (6,7 ккал / г), как в предыдущем исследовании. ¹¹ Обычный рацион, содержащий в основном обезжиренную соевую муку и рыбную муку, называется экструдированной диетой (CE-2, Clea Japan Inc.).

Процедуры.

CT-II первоначально показал ингибирующую активность в отношении липазы в исследовании in vitro . Поскольку чрезмерное потребление пищевых жиров способствует развитию ожирения, было изучено профилактическое действие экстракта на развитие ожирения у крыс, получавших диету с высоким содержанием жиров. После адаптации к высокожировой диете и лабораторным условиям в течение 1 недели тощие крысы массой 239–251 г были разделены на две группы. Контрольной группе давали только диету с высоким содержанием жиров; другая группа получала диету с высоким содержанием жиров с добавлением CT-II в концентрации 2.5%. Вес тела измеряли каждую неделю. После 8 недель лечения CT-II животных умерщвляли, измеряли вес органов и исследовали органы гистологически (эксперимент 2).

Затем исследовали влияние дозы CT-II на массу тела и метаболиты плазмы у крыс. Постные крысы массой 265–298 г были разделены на шесть групп. Контрольной группе давали только диету с высоким содержанием жиров, как в эксперименте 2. Пять других групп получали диету с высоким содержанием жиров с добавлением CT-II в концентрациях 0.5%, 1,0%, 1,5%, 2,5% и 3,5% соответственно. Масса тела измерялась через 4, 7, 11 и 14 дней после начала лечения CT-II, а ежедневное потребление пищи измерялось в течение 2-недельного периода лечения. После этого через 12 ч голодания брали кровь из яремной вены. Образцы центрифугировали, плазму отделяли и замораживали до анализа. Триглицерид плазмы (ТГ), общий холестерин (TC), глюкоза, аспартатаминотрансфераза (AST, EC 2.6.1.1) и аланинаминотрансфераза (ALT, EC 2.6.1.2) были измерены с использованием процедур, описанных ниже в разделе «Анализы» (эксперимент 3).

Наконец, оценивали, может ли CT-II снизить ожирение у крыс, получавших диету с высоким содержанием жиров. Крысы, у которых ожирение было вызвано диетой с высоким содержанием жиров, и весящими 570–718 г, были разделены на две группы. Контрольная группа (средняя масса тела 643 г) продолжала получать только эту диету. Вторая группа (средняя масса тела 641 г) получала диету с высоким содержанием жиров с добавлением CT-II в концентрации 2.0%. Вес тела измеряли еженедельно. После 4 недель лечения в течение 3 дней измеряли потребление пищи, общий выход жира и общий холестерин с фекалиями. После 12 недель лечения кровь брали из сердца после 12 часов голодания, плазму отделяли и замораживали до анализа (TG, TC, глюкоза, AST, ALT и инсулин; эксперимент 4).

Анализы.

Глюкозу анализировали глюкозооксидазным методом. Общий холестерин (TC), триглицерид (TG), аспартатаминотрансфераза (AST) и аланинаминотрансфераза (ALT) анализировали с помощью сухого химического автоанализатора (AU-5200, OLYMPUS).Инсулин определяли иммунологическим анализом. ¹² Вес органов (параметриальный жир, печень, сердце и почки) измеряли и записывали как процент от конечной массы тела вместе с абсолютными значениями. Общий жир туши определяли экстракцией из лиофилизированного гомогената туши без кожи. С туши сняли кожу, а прикрепленный к коже подкожный жир соскоблили острым ножом или шпателем. Тушку без кожи и подкожный жир объединяли и гомогенизировали, дважды пропуская через мясорубку (Meat Mincer β10, BONNY Inc.) пластиной с ячейками 3,2 мм, а затем лиофилизировали. Экстракцию липидов из лиофилизированного гомогената туши без кожи проводили методом Фолча, ¹³ , экстракты выпаривали в вакууме и взвешивали. Общее содержание жира рассчитывали как абсолютное значение, так и процент от конечной массы тела.

Статистический анализ.

Данные выражены как среднее ± стандартное отклонение. и проанализированы с помощью теста Стьюдента и Аспина-Велча t или повторных измерений однофакторного дисперсионного анализа, где это необходимо; a P -значение <0.05 считалось значительным.

(PDF) Ингибиторы липазы при ожирении: обзор

идентификация, Biochimie. 107 (2014) 124–134.

[54] A.M. Хек, Дж. Яновский, К. Калис, Орлистат, новый ингибитор липазы для лечения ожирения

, Фармакотерапия 20 (3) (2000) 270–279.

[55] C.H. Кристина, О. Мануэль, П. Грегори, М. Жюли, М. Е. Изабель, Д. Фабиола,

Д. Фредерик, Ингибитор липазы орлистат снижает включение эйкозапентаеновой

и докозагексаеновой кислоты в тканях крыс, Nutr.Res. 30 (2) (2010) 134–140.

[56] Л.С. Чупак, X.F. Чжэн, С. Хуа, А. Макклюр, Р.Г. Gentles, Исследования взаимосвязи структурной активности

на химически инертных глицинсульфонамидных ингибиторах диацилглицеринлипазы

, Bioorg. Med. Chem. 24 (2016) 1455–1468.

[57] M.M. Малвихилл, Д. Номура, Терапевтический потенциал ингибиторов моноацилглицерин липазы

, Life Sci. 92 (2013) 492–497.

[58] W.J. Zhang, Полный синтез природного ингибитора панкреатической липазы Norartocarpin,

Fu Dan University, Shanghai, 2012, pp.1–56.

[59] Z.H. Цао, Д.Х. Гу, Q.Y. Линь, З.К. Сюй, Q.C. Хуанг, Х. Рао, Э.В. Лю, Дж. Дж. Jia,

C.R. Ge, Влияние чая пуэр на жировые и липидные профили у крыс с ожирением, индуцированным диетой

, Phytother. Res. 25 (2011) 234–238.

[60] Q. Li, Z.H. Лю, Дж. Хуанг, Г.А. Луо, Q.L. Лян, Д. Ван, X.Y. Е, К. Б. Ву,

Л.Л. Ван, Дж. Х. Ху, Противодействие ожирению и гиполипидемические эффекты водяного экстракта кирпичного чая Fuzhuan

у крыс с ожирением, вызванных диетой с высоким содержанием жиров, J.Sci. Продовольственное сельское хозяйство. 93 (2013)

1310–1316.

[61] X.L. Ву, W.Y. Он, Х. Чжан, Ю. Ли, З.Г. Лю, З.Д. He, Acteoside: ингибитор липазы

из китайского чая Ligustrum purpurascens kudingcha, Food Chem. 142 (2014)

306–310.

[62] L.J. Yang, J. Wang, Q.X. Ян, Ингибирующее действие черного чая на липазу поджелудочной железы,

Food Sci. Technol. 40 (8) (2015) 212–222.

[63] N.T. Луен, L.H. Tram, T.T.H. Хань, П. Бинь, Н.Х. Данг, К.В. Минь, Н. Dat,

Ингибиторы α-глюкозидазы, α-амилазы и липазы из Chrysanthemum mor-

ifolium, Phytochem. Lett. 6 (2013) 322–325.

[64] Э. Като, Р. Накагоми, M.D.P.T. Гунаван-Путери, Дж. Кавабата, Идентификация

гидроксихавикола и его димеров, ингибиторов липазы, содержащихся в индонезийской специи

, Eugenia polyantha, Food Chem. 136 (2013) 1239–1242.

[65] П. Маримуту, G.R. Алисия, Р.Р. Алехандро, Р. Франциско, С.R. Cristina Guillermo,

Тестирование съедобных грибов на ингибирование активности липазы поджелудочной железы на модели расщепления in vitro

, Int. J. Food Sci. Technol. 47 (2012) 1004–1010.

[66] J.N. Хо, Дж. Jang, HG Yoon, Y. Kim, S. Kim, J. Junc, J. Leea, Эффект против ожирения

стандартизированного этанольного экстракта из Curcuma longa L., ферментированного

Aspergillus oryzae у мышей ob / ob и первичных адипоциты мышей, J. Sci. Еда.

Сельское хозяйство. 92 (2012) 1833–1840.

[67] I.J. Флорес-Санчес, Д. Gang, Ингибирование тиоэстераз гидроксициннамоил-КоА

в имбире (Zingiber o cinale Rosc.) И куркуме (Curcuma longa L.) ингибиторами липазы

, Plant Physiol. Biochem. 72 (2013) 46–53.

[68] K. Sakulnarmrat, G. Srzednicki, I. Konczak, Антиоксидант, ингибитор ферментов и

антипролиферативная активность полифенольной фракции коммерческого сухого порошка имбиря

, Inter. J. Food Sci. Tech. 50 (2015) 2229–2235.

[69] T.K. Окада, А. Ито, А. Койде, Ю. Накамура, К.Х. Хан, К. Шимада, К. Сасаки,

,

, К. Охба, С. Сибаямак, М. Фукусима, Роль экстракта бобов адзуки

, содержащего полифенолы, в борьбе с ожирением: эффекты in vivo и in vitro, J. Sci. Продовольственное сельское хозяйство. 92 (2012)

2644–2651.

[70] П. Янг, Y.Q. Ли, Ингибирующее действие флавоноидов и фагопиритов гречихи

на липазу поджелудочной железы, Food Science 36 (11) (2015) 60–63.

[71] А. Кумар, Г.С. Чаухан, Экстракция и характеристика пектина из жмыха яблока

и его оценка в качестве ингибитора липазы (стеапсина), Carbohydr. Polym. 82

(2010) 454–459.

[72] R. Liu, J.Z. Чжан, Ю. Чжэн, Б.Дж. Сюй, В.С. Лю, Скрининг ингибиторов липазы поджелудочной железы

из фруктов и овощей, J. Jilin Agr. Univ. 34 (2) (2012) 211–215.

[73] T.T. Fan, Исследование гиполипидемической и снижающей вес активности алкалоидов из листьев лотоса

, Университет Чжэ Цзян, Цзянсу, 2010, стр.1–61.

[74] Q. Tian, ​​Z.J. Ву, Д. Хуанг, Х. Ван, Дж. Чжан, Х.Л. Фу, Оптимизация условий

для выделения вещества, ингибирующего липазу поджелудочной железы, из виноградных косточек, Food

Res. Dev. 31 (4) (2010) 41–44.

[75] R. Liu, Y.N. Чжэн, Эффекты против ожирения ингибиторов панкреатической липазы женьшеня panax

и американского женьшеня, J. Ginseng Res. 1 (2010) 14–19.

[76] Дж. Гу, Ю. Сан, Исследование ингибирования липазы поджелудочной железы и антиокисления из

листьев platycladus orientalis in vitro, Chin.J. Exp. Tradit. Med. Формулы. 21 (14)

(2015) 141–144.

[77] П. Эркан, С.Н. EI, Ингибирующее действие нута и Tribulus terrestris на липазу, α-

амилазу и α-глюкозидазу, Food Chem. 205 (2016) 163–169.

[78] S.H. Эом, М. Ли, Э.В.Ли, Ю.М. Ким, Т. Kim, Pancreatic Lipase Inhibitory

Активность флортанинов, выделенных из Eisenia bicyclis, Phytother. Res. 27 (2013)

148–151.

[79] П.И. Чейтер, М. Уилкокс, П.Cherry, A. Herford, S. Mustar, H. Wheater, I. Brownlee,

C. Seal, J. Pearson, Ингибирующая активность экстрактов гебридских бурых морских водорослей в отношении активности липазы

, J. Appl. Phycol. 28 (2016) 1303–1313.

[80] D. Houghton, M.D. Wilcox, P.I. Чатер, И. Brownlee, C.J. Seal, J.P. Pearson,

Биологическая активность альгината и его влияние на ингибирование липазы поджелудочной железы как потенциальное средство лечения ожирения

, Food Hydrocolloids 49 (2015) 18–24.

[81] М.Мията, Т. Кояма, К. Ядзава, Водный экстракт Houttuynia cordata thunb.

Листья действуют против ожирения, ингибируя абсорбцию жирных кислот и глицерина,

J. Nutr. Sci. Витаминол. 56 (2010) 150–156.

[82] Л.Ф. Лян, Т. Ван, Ю.С. Цай, В.Ф. Он, П. Сан, Ю. Ф. Ли, К. Хуанг, О. Тальялатела —

Скафати, Х.Ю. Ван, Ю.В. Guo, Бромированные полиненасыщенные липиды из китайской губки

Xestospongia testudinaria как новый класс липазы поджелудочной железы в гибиторах

, Eur.J. Med. Chem. 79 (2014) 290–297.

[83] Э. Като, М. Яма, Р. Накагоми, Т. Шибата, К. Хосокава, Дж. Кавабата, Substrate-

, подобные водорастворимым ингибиторам липазы от Filipendula kamtschatica, Bioorg. Med.

Chem. Lett. 22 (2012) 6410–6412.

[84] Патил С.Г., М.П. Патил, В. Махешвари, Р.Х. Патил, Эффект ингибирования липазы in vitro

и кинетические свойства ди-терпеноидной фракции из Calotropis procedure (Aiton),

Biocatal. Agric. Biotechnol.4 (2015) 579–585.

[85] К. Кога, М. Хисамура, Т. Канетака, К. Йошино, Ю. Мацуо, Т. Танака,

Олигомеры проантоцианидина, выделенные из листьев Salacia reticulata, эффективно

ингибируют активность липазы поджелудочной железы, J. Food Sci. . 78 (2013) 105–111.

[86] Т. Бухгольц, М.Ф. Мельциг, Лекарственные растения, традиционно используемые для лечения ожирения и сахарного диабета

— скрининг на липазу поджелудочной железы и альфа-амилазу в гибиции

, Phytother. Res.30 (2016) 260–266.

[87] Дж. Ким, Ю.С. Ли, К.С. Ким, Дж. Ким, Бетулиновая кислота оказывает ингибирующее действие на липазу поджелудочной железы

и индуцирует липолиз адипоцитов, Phytother. Res. 26 (2012)

1103–1106.

[88] J.H. Ким, Х.Дж. Ким, К. Ким, Х. Юнг, Ю.О. Ким, J.Y. Джу, К.С. Шин, Разработка ингибиторов липазы

из различных производных пигмента монаскуса, продуцируемого ферментацией

Monascus, Food Chem. 101 (2007) 357–364.

[89] Дж.Х. Ан, К. Лю, К. Ли, М.Дж. Ан, Х.С. Ю, B.Y. Хван, М. Ли, Новый ингибитор креатической липазы pan-

из Broussonetia kanzinoki, Bioorg. Med. Chem. Lett. 22

(2012) 2760–2763.

[90] S.R. Вон, С.К. Ким, Ю.М. Ким, П. Ли, Дж. Рю, Дж. Ким, Х. Rhee,

A. Ликохалкон, ингибитор липазы из корней Glycyrrhiza uralensis, Food

Res. Int. 40 (2007) 1046–1050.

[91] C. Roh, U. Jung, Экстракт Nepeta japonica Maximowicz из натуральных продуктов, снижающий накопление липидов,

, J Sci.Продовольственное сельское хозяйство. 92 (2012) 2195–2199.

[92] Р.Ф. Оливейра, Г.А. Гонсалвеш, Ф. Инасио, Э.А. Koehnlein, C.G. Marques de Souza,

A. Bracht, R.M. Перальта, Ингибирование липазы поджелудочной железы и триацилглицерина

Поглощение в кишечнике экстрактом пинхао (Araucaria angustifolia), богатым конденсированным танином

, Nutrients 7 (2015) 5601–5614.

[93] П. Р. Кирога, Н. Р. Гроссо, А. Ланте, Дж. Ломолино, Я.А. Zygadlo, V. Nepote,

Химический состав, антиоксидантная активность и антилипазная активность эфирных масел Origanum

vulgare и Lippia turbinata, Int.J. Food Sci. Technol. 48 (2013)

642–649.

[94] S.A. Pai, E.A.F. Мартис, С.Г. Джоши, Р.П. Мунши, А.Р. Juvekar, Plumbagin

действует против ожирения за счет ингибирования липазы поджелудочной железы и дифференциации адипоцитов, Phytother Res 32 (2018) 1631–1635.

[95] Y. Gu, W.J. Hurst, D.A. Стюарт, Дж. Д. Ламберт, Ингибирование ключевых пищеварительных ферментов

,

, экстрактами какао 1 и процианидинами, J. Agric. Еда. Chem 59 (10) (2011)

5305–5311.

[96] Х. Белфеки, М. Мейри, М. Хассуна, Антиоксидантная и антилипазная активность in vitro

экстрактов Mentha viridis и Eucalyptus globulus, Ind. Crops. Prod. 89 (2016)

514–521.

[97] H.S. Чаэ, Э. Ким, Л. Хан, Н. Ким, Б. Лам, Дж. Х. Пайк, К. Юн, Ю. Чой,

Ю.В. Chin, ксантоны с активностью ингибирования липазы поджелудочной железы из перикарпий

Garcinia mangostana L. (Guttiferae), Eur. J. Lipid Sci. Technol. 118 (2016) 1–6.

[98] X.L. Ву, W.Y. Он, Х. Чжан, Ю. Ли, З.Г. Лю, З.Д. He, Acteoside: ингибитор липазы

из китайского чая Ligustrum purpurascens kudingcha, Food Chem. 142 (2014)

306–310.

[99] Y. Fan, Y. Xu, Q.G. Хан, Л.Л. Шен, Х. Сюй, З.Б. Ву, X. Xu, M. Ying, Z.D. Он,

З.Л. Ху, Изучение механизма ингибирования и природы липазы с помощью лигупурпурозида

A, экстрагированного из чая Ku-Ding, Med. Chem. Res. 27 (2018) 1822–1833.

[100] стр.Эрджан, С. EI, Ингибирующее действие нута и Tribulus terrestris на липазу, α-

амилазу и α-глюкозидазу, Food Chem. 205 (2016) 163–169.

[101] С.С. Патил, М.П. Патил, В. Махешвари, Р.Х. Патил, Эффект ингибирования липазы in vitro

и кинетические свойства ди-терпеноидной фракции из Calotropisprocera (Aiton),

Biocatal. Agric. Биотехнология 4 (2015) 579–585.

[102] R. Liu, J.Z. Чжан, Ю. Чжэн, Б.Дж. Сюй, В.С. Лю, Скрининг ингибиторов панкреатической липазы

из фруктов и овощей, J.Jilin Agr. Univ. 34 (2) (2012)

211–215.

[103] X. Liao, Y.T. Чжу, X.Y. Рен, Л. Юань, Ю.М. Лю, Дж. Лян, X. Ляо, Быстрая идентификация

ингибиторов липазы в чае улун с использованием функционализированных липазой магнитных наночастиц Fe3O4

в сочетании с UPLC – MS / MS, Food Chem. 173 (2015) 521–526.

[104] С. Сяо, Р. Р. Ю, Н. Ай, X.H. Fan, Быстрый скрининг ингибиторов липазы естественного происхождения

из гиполипидемических распадов с помощью ультрафильтрации в сочетании с жидкостной хроматографией-масс-спектрометрией, J.Pharm. Биомед. Анальный. 104 (2015) 67–74.

[105] В.К. Байнени, С. Суреш, Дж. Сингх, Р.К. Kadeppagari, Разработка биоавто-

графического метода для обнаружения ингибиторов липазы, Biochem. Биофиз. Res.

Commun. 453 (2014) 784–786.

[106] Y. Tao, Y.F. Чжан, Ю. Ван, Ю.Ю. Cheng, отбор на основе полого волокна

в сочетании с высокоэффективной жидкостной хроматографией-масс-спектроскопией для быстрого скрининга ингибиторов липазы

из листьев лотоса, Anal.Чим. Acta. 785 (2013)

75–81.

[107] J.R. Savinainen, M. Yoshino, A. Minkkila, et al., Характеристика связывающих свойств

ингибиторов моноглицерид липазы с помощью универсального метода

, основанного на флуоресценции, Ana. Biochem. 399 (2010) 132–134.

T.-T. Лю и др. Биомедицина и фармакотерапия 128 (2020) 110314

9

RHC-80267, ингибитор диацилглицеринлипазы (CAS 83654-05-1) (ab141758)

Обзор

• Название продукта

  RHC-80267, ингибитор диацилглицеринлипазы

• Описание

  Селективный ингибитор диацилглицеринлипазы

• Биологическое описание

  Селективный ингибитор диацилглицеринлипазы (IC ₅₀ = 4 мкМ).Усиливает индуцированное ацетилхолином расслабление гладких мышц in vitro .

• Чистота

  > 98%

• Номер CAS

  83654-05-1

• Химическая структура

Недвижимость

• Химическое название

  1,6-бис (циклогексилоксиминокарбониламино) гексан

• Молекулярный вес

  394.60

• Химическая формула

  C ₂₀ H ₃₄ N ₄ O ₄

• Идентификатор PubChem

  5063

• Инструкции по хранению

  Хранить при комнатной температуре. Срок хранения до 12 месяцев.

• Обзор растворимости

  Растворим в ДМСО до 50 мМ и в этаноле до 50 мМ

• Обработка

  По возможности, вы должны готовить и использовать растворы в тот же день.Однако, если вам необходимо заранее приготовить исходный раствор, мы рекомендуем хранить раствор в виде аликвот в плотно закрытых флаконах при -20 ° C. Как правило, их можно использовать до одного месяца. Перед использованием и перед открытием флакона мы рекомендуем дать вашему продукту уравновеситься до комнатной температуры в течение как минимум 1 часа.

  Нужна дополнительная информация о растворимости, использовании и обращении? Посетите нашу страницу часто задаваемых вопросов (FAQ) для получения более подробной информации.

• УЛЫБКИ

  C1CCC (= NOC (= O) NCCCCCCNC (= O) ON = C2CCCCC2) CC1

• Источник

• Направления исследований

Протоколы

Насколько нам известно, для этого продукта не требуются индивидуальные протоколы.Пожалуйста, попробуйте стандартные протоколы, перечисленные ниже, и сообщите нам, как у вас дела.

Щелкните здесь, чтобы просмотреть общие протоколы

Листы данных и документы

• SDS скачать
  

  Страна / регион Выберите страну / регион

  Язык Выбрать язык

• Скачать брошюру
  

Список литературы (0)

ab141758 еще не упоминался в каких-либо публикациях.

Отзывы и ответы клиентов

Быстрая и глубокая перестройка липидных сигнальных сетей мозга за счет острого ингибирования диацилглицерин липазы

Классически понимаемые формы нейротрансмиссии включают полярные небольшие молекулы, которые хранятся в синаптических везикулах и высвобождаются в ответ на деполяризующие сигналы, которые способствуют слиянию везикул с пресинаптической плазматической мембраной нейронов (1). Совсем недавно липиды были признаны отдельным типом химических посредников в нервной системе, которые, по-видимому, генерируются во время предполагаемого действия, а не накапливаются в пузырьках (2–5).Эта модель производства «по требованию» предполагает использование ферментов биосинтеза липидов в качестве основных регуляторов передачи химических сигналов в центральной нервной системе (ЦНС). В подтверждение этого предположения, ферменты, которые продуцируют несколько классов липидных трансмиттеров, включая лизофосфолипиды (6), эйкозаноиды (7) и эндоканнабиноиды (8, 9), высоко экспрессируются в нервной системе и играют важную роль в развитии мозга. синаптическая пластичность и модуляция сложного поведения. Например, ферменты липазы диацилглицерина (DAG) DAGLα и DAGLβ (10) продуцируют эндоканнабиноид 2-арахидоноилглицерин (2-AG) (11, 12), а конститутивное генетическое нарушение DAGLα снижает 2-AG мозга и арахидоновую кислоту (AA ) (13, 14), что приводит к нарушению синаптической пластичности (13, 14), гипофагии (15), усилению реакции тревоги и страха (16, 17) и склонности к спонтанным припадкам (15).

Многие биоактивные липиды имеют общие структурные особенности и, в принципе, могут быть связаны друг с другом многоступенчатыми метаболическими путями (2, 18, 19), что указывает на возможность перекрестного взаимодействия между липидными сигнальными путями in vivo. Такие перекрестные помехи могут создавать более сложные формы интегрированной или противовесной передачи сигналов, чтобы влиять на сложные физиологические или болезненные процессы динамическим образом. Однако степень, в которой отдельные ферменты в более крупных метаболических путях контролируют множество биоактивных липидов, остается малоизученной.Этот вопрос может быть изучен на генетически модифицированных мышах, лишенных определенных ферментов метаболизма липидов, но долговременная конститутивная инактивация ферментов делает эти модели плохо подходящими для различения быстрых и динамических процессов от более медленных адаптивных изменений, которые могут происходить в липидных путях. С другой стороны, фармакологические подходы предоставляют мощные средства для оценки временных последствий острой ферментативной блокады на динамический состав липидных сетей в головном мозге как при физиологических, так и при патологических условиях.К сожалению, селективные и активные in vivo ингибиторы для многих ферментов биосинтеза липидов пока недоступны. Известные ингибиторы DAGL, например, были использованы для изучения функции 2-AG как ретроградного мессенджера в препаратах нервных клеток и срезов головного мозга (20–25), но эти ингибиторы не обладают селективностью (26), эффективность и химические свойства (21), необходимые для центральной активности in vivo.

Здесь мы описываем синтез и характеристики ЦНС-активных, ковалентных 1,2,3-триазолмочевинных ингибиторов DAGLα и -β, которые в сочетании со структурно родственным контрольным соединением и специально подобранными зондами на основе активности обеспечивают набор химических инструментов для исследования функции DAGL in vivo.Мы показываем, что острая фармакологическая блокада DAGL приводит к быстрой и драматической реорганизации липидных сигнальных путей в головном мозге, включая повышение биоактивных DAG и снижение двух основных эндоканнабиноидов [2-AG и N -арахидоноилэтаноламин (анандамид или AEA). ], арахидоновая кислота и простагландины PGD ₂ и PGE ₂ . Ингибиторы DAGL также нарушают эндоканнабиноид-зависимые формы синаптической пластичности и ослабляют вызванные липополисахаридом нейровоспалительные реакции, включая снижение внутренней температуры тела (анапирексия).Эти находки подчеркивают особую роль, которую ферменты DAGL играют как интегративные узлы для координации перекрестного взаимодействия между несколькими классами липидных трансмиттеров для модуляции нейро (иммуно) логических функций в ЦНС.

Результаты

Мощные и селективные 1,2,3-триазольные ингибиторы мочевины DAGLα.

Разработке ингибиторов DAGL исторически препятствовала нехватка анализов для мониторинга активности этих ферментов в природных биологических системах. Недавно мы представили специальные зонды на основе активности, которые позволяют проводить независимый и одновременный мониторинг активности DAGLα и DAGLβ в головном мозге и других типах тканей / клеток (27, 28).Руководствуясь методами профилирования белков на основе конкурентной активности (ABPP) (29), мы превратили один из этих специализированных зондов в серию мощных ингибиторов 1,2,3-триазолмочевины (1,2,3-TU) DAGLβ, которые показали периферическая, но не центральная активность in vivo (27) [например, KT172 ( 1 )] (рис. 1 A ). Здесь мы намереваемся дополнительно модифицировать и оптимизировать каркас 1,2,3-TU для создания селективных и активных в отношении ЦНС ингибиторов DAGLα и -β. Вкратце мы обнаружили, что модификации дистального фенильного кольца, присоединенного к триазольной уходящей группе KT172, давали ингибиторы (например,g., DO6, DO13) с хорошей эффективностью в отношении DAGLα и умеренным ингибированием DAGLβ ( SI, приложение , фиг. S1), но полученные соединения проявляли небольшую активность ЦНС или ее отсутствие in vivo. Поэтому мы обратили наше внимание на модификацию остающейся группы каркаса 1,2,3-TU (рис. 1 A , синий), которая в сочетании с усеченными удлинениями уходящей группы триазола (рис. 1 A ) , черный), предоставили два структурно различных соединения — Dh476 ( 4 ) ​​и DO34 ( 5 ) ​​- в качестве сильнодействующих ингибиторов DAGL (рис.1 А ). Dh476 и DO34 блокировали превращение DAGLα 1-стеароил-2-арахидоноил- sn -глицерин (SAG) в 2-AG со значениями IC ₅₀ 6 нМ [5–9 нМ; 95% доверительный интервал (ДИ), n = 4] и 6 нМ (3–11 нМ 95% ДИ, n = 4), соответственно (Рис. 1 B и SI Приложение , Таблица S1) , как определено с использованием анализа естественного субстрата на основе флуоресценции в реальном времени с мембранными лизатами из клеток HEK293T, экспрессирующих рекомбинантный человеческий DAGLα (30).Используя этот субстратный анализ, мы также подтвердили, что Dh476 и DO34 были мощными ингибиторами DAGLβ со значениями IC ₅₀ 3-8 нМ (Рис. 1 B и SI Приложение , Таблица S1).

Рис. 1.

Открытие ингибиторов 1,2,3-TU (Dh476, DO34) и контрольного зонда (DO53) для DAGL. ( A ) Химические структуры исходного ингибитора DAGL KT172 и структурно родственного контрольного зонда KT195, выделяющие консервативные особенности [синий (оставшиеся группы, KT172, Dh476, DO34), красный (реактивные группы триазолмочевины), зеленый (оставшиеся группы, KT195 и DO53) )] и модификации (черный), которые предоставили мощные ингибиторы DAGL Dh476 и DO34 и контрольный зонд DO53.( B ) Зависимое от концентрации ингибирование активности рекомбинантного человеческого DAGLα и мышиного DAGLβ с помощью Dh476, DO34 и DO53, как измерено с помощью анализа субстрата SAG в DAGL-трансфицированных клетках HEK293T (30). Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение; n = 4 на группу.

Dh476 обладает хиральным пропаргиловым эфиром в положении C4 оставшейся группы, который, как мы предположили, может служить средством введения репортерных групп с помощью химии азид-алкинового циклоприсоединения, катализируемого медью (CuAAC или «щелчок») (31), для получения дополнительный класс DAGL-ориентированных зондов на основе активности для исследований целевого взаимодействия.С этой целью мы синтезировали дериватизированный BODIPY аналог Dh476, названный Dh479 ( 6 ), и подтвердили, что этот зонд пометил рекомбинантные DAGLα и DAGLβ и обнаружил эти ферменты в протеоме мембраны мозга мыши ( SI Приложение , рис. S2. ).

Затем мы использовали конкурентные анализы ABPP для оценки активности и селективности Dh476 и DO34 против эндогенных DAGL и других сериновых гидролаз в протеоме мембраны мозга мыши. Мы выполнили эти исследования с тремя различными зондами, основанными на активности: двумя зондами, основанными на активности DAGL, — Dh479 ( SI, приложение , рис.S2) и HT-01 (27) — и зонд широкого спектра действия, направленный на серингидролазу, фторфосфонат-родамин (FP-Rh) (32). HT-01 и Dh479 предоставили анализы взаимодействия с мишенью для DAGL, а FP-Rh оценил перекрестную реактивность с широким спектром сериновых гидролаз головного мозга. Dh476 и DO34 ингибировали мечение DAGLα и -β с помощью Dh479 ( SI, приложение , рис. S3, A, и B, и таблица S1) и HT-01 ( SI, приложение , рис. S3, C, и D). и Таблица S1) со значениями IC ₅₀ в диапазоне 0.5–1,2 (DAGLα) и 2,3–4,8 (DAGLβ) нМ соответственно. Значения IC ₅₀ , измеренные для DAGLα с помощью конкурентного ABPP, были примерно в 10 раз ниже, чем значения, измеренные с помощью анализа субстрата SAG, что могло отражать различия в эндогенных и рекомбинантных формах этого фермента. DO34 и Dh476 показали превосходную селективность в отношении DAGL, при этом единственными обнаруживаемыми нецелевыми серингидролазами были ABHD6 и PLA2G7 ( SI, приложение , рис. S3). Наконец, Dh476 и DO34 показали минимальное и незначительное связывание, соответственно, с каннабиноидными рецепторами CB ₁ (CB ₁ R) и CB ₂ (CB ₂ R), как измерено с помощью анализов связывания радиолигандов (IC ₅₀ ). значения> 1 мкМ) ( SI Приложение , рис.S4).

Ранее мы показали, что аналоги 2-фенилпиперидина, такие как KT195 ( 7 ) ​​(фиг. 1 A ), служат в качестве полезных неактивных контрольных зондов, которые демонстрируют значительно ослабленное ингибирование DAGL, сохраняя при этом активность против обычных -цели типа ABHD6 (27). Основываясь на этом прецеденте, мы синтезировали DO53 ( 8 ), 2-фенилпиперазиновый аналог DO34, и обнаружили, что этот агент проявляет примерно в 100 раз меньшую активность против DAGLα по сравнению с DO34 или Dh476, как измерено гидролизом субстрата DAG (рис. .1 B, и SI, приложение , таблица S1) или конкурентные анализы ABPP в мозге мыши ( SI, приложение , рис. S3 и таблица S1). С другой стороны, DO53 перекрестно реагировал с общими нецелевыми объектами DO34 и Dh476 ( SI Приложение , рис. S3), обозначая DO53 в качестве потенциально подходящего контрольного соединения для биологических исследований ферментов DAGL.

Ингибиторы DAGLα центрально активны in vivo.

Мы ввели Dh476, DO34, DO53 или носитель внутрибрюшинно самцам мышей C57BL / 6 в диапазоне доз 3–50 мг / кг.Через 4 ч животных умерщвляли и анализировали ткань мозга с помощью конкурентного ABPP с Dh479, HT-01 и FP-Rh, который выявлял четкую дозозависимую блокаду активности DAGLα как для Dh476, так и для DO34 со значениями ED ₅₀ , равными 5. –10 мг / кг (Рис. 2 A и B и SI Приложение , Рис. S5), и полное ингибирование фермента наблюдается при 30–50 мг / кг ингибитора. DAGLβ (и ABHD6) также ингибировались Dh476 и в меньшей степени DO34, который вместо этого проявлял перекрестную реактивность с PLA2G7 (рис.2 A и B и SI Приложение , рис. S5). DO53, с другой стороны, существенно не ингибировал DAGLα или -β при любой испытанной дозе (рис. 2 C и SI, приложение , рис. S5), но подавлял как ABHD6, так и PLA2G7 (рис. 2 C ). и SI Приложение , рис. S5). Мы конъюгировали протеомы мозга мышей, получавших Dh476, с флуорофором Cy5 с помощью CuAAC, что подтвердило прямое дозозависимое мечение ферментов DAGL ( SI, приложение , рис.S5 E – G ).

Рис. 2.

Активность и селективность Dh476, DO34 и DO53 in vivo у мышей. ( A-C ) Дозозависимое ингибирование DAGLα и DAGLβ в ткани мозга мышей, получавших Dh476 ( A ), DO34 ( B ) и DO53 ( C ) (указанные дозы, внутрибрюшинно, 4 -h обработки), как определено конкурентным ABPP с использованием зонда Dh479 (1 мкМ, 30 мин). ( D ) ABPP-ReDiMe анализ активности серингидролазы мозга мышей, получавших Dh476 (50 мг / кг, т.p., 4-часовая обработка), где сериновые гидролазы были помечены и обогащены с помощью зонда FP-биотина (33). Показаны типичные хроматограммы MS1 для DAGLα и DAGLβ, а также дополнительные мишени серингидролазы. Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 4 мыши на группу. ( E ) Сводная информация о серингидролазных мишенях Dh476, DO34 и DO53 в мозге мышей. Сериновые гидролазы со значениями отношения ReDiMe <0,5 были определены как мишени для каждого ингибитора. Обратите внимание, что DAGLα и DAGLβ являются единственными двумя сериновыми гидролазами, которые, как было обнаружено, ингибируются как Dh476, так и DO34, но не DO53 в мозге мыши.

Мы подтвердили и расширили эти профили поражения цели, выполнив ABPP в сочетании с количественной масс-спектрометрией (МС) высокого разрешения. Вкратце, протеомы мозга мышей, обработанных ингибитором и носителем, инкубировали с зондом FP-биотина на основе направленной серингидролазой активности (33), и меченные зондом ферменты обогащали стрептавидиновой хроматографией, расщепляли на шарике трипсином и полученные триптические пептиды модифицированы восстановительным диметилированием (ReDiMe) остатков лизина с использованием изотопно тяжелого и легкого формальдегида соответственно (34).В этих экспериментах ингибированные сериновые гидролазы идентифицированы как ферменты, показывающие низкие отношения ReDiMe тяжелой / легкой. Количественная МС подтвердила полное ингибирование DAGLα с помощью Dh476 и DO34, причем DAGLβ также сильно и частично ингибируется этими соединениями, соответственно, и выявила следующие нецелевые (определяемые как сериновые гидролазы с отношениями тяжелая / легкая <0,5): ABHD6 (Dh476 , DO34), CES1C (Dh476, DO34), ABHD2 (DO34), BCHE (Dh476), LIPE (Dh476), PAFAh3 (DO34) и PLA2G7 (DO34) (рис.2 D , SI Приложение , рис. S6 A и набор данных S1). DO53 показал незначительную активность против DAGLα или β (соотношение тяжелый / легкий ∼0,8), но перекрестно реагировал со многими нецелевыми Dh476 и DO34 (ABHD2, ABHD6, CES1C, PLA2G7, PAFAh3) ( SI Приложение , Рис. S6 B и набор данных S1). Взятые вместе (рис.2 E ), эти конкурентные исследования ABPP обозначили Dh476 и DO34 как in vivo-активные ингибиторы с дополнительными профилями селективности, которые при использовании в сочетании с контрольным зондом DO53 могут сообщать о функции DAGL в ЦНС.

Затем мы исследовали динамику ингибирования DAGL у мышей. При высокой дозе (50 мг / кг) Dh476 и DO34, но не DO53, продемонстрировали устойчивое ингибирование DAGL в течение до 8 часов с частичным восстановлением через 24 часа после приема (Рис.3 A и SI Приложение , Рис. S5 C ). Интересно, что более низкая доза Dh476 (3 мг / кг) вызывала существенное ингибирование DAGLα в течение 30 минут после введения, но активность фермента быстро восстанавливалась через 4 часа (рис. 3 B и C ).Напротив, DAGLβ только частично ингибировался при 3 мг / кг (фиг. 3 B ), тогда как нецелевой ABHD6 оставался ингибированным до 8 часов (фиг. 3 B и C ). Мы подтвердили эти различия в продолжительности взаимодействия с мишенью посредством ex vivo CuAAC-опосредованной конъюгации Cy5-азидной метки с протеомами мозга мышей, получавших Dh476, которые показали сильное, но временное мечение Dh476 DAGLα и устойчивую реактивность с ABHD6 (рис. 3 D и E ). Восстановление активности DAGLα в этом временном исследовании при низкой дозе лекарственного средства может указывать на то, что DAGLα представляет собой белок с коротким периодом полужизни, который быстро разлагается и заменяется вновь синтезированным ферментом, или что взаимодействие Dh476-DAGLα является обратимым.Однако, опровергая последнюю гипотезу, мы обнаружили, что ингибирование и прямое мечение DAGLα с помощью Dh476 сохранялось после эксклюзионной хроматографии, что контрастировало со значительным восстановлением активности DAGLα, наблюдаемым в этом эксперименте с обратимым ингибитором LEI105 (25) ( SI Приложение , рис. S7). Dh476, но не LEI105, также показал зависящее от времени увеличение активности против DAGLα, и после предварительной инкубации не смог вытеснить избыток субстрата ( SI Приложение , рис.S7), дополнительные признаки необратимого механизма действия. Таким образом, наши результаты подтверждают, что DAGLα представляет собой белок с коротким периодом полужизни в ЦНС, и дополнительно демонстрируют, что устойчивое ингибирование DAGLα в течение многих часов может быть достигнуто при более высоких дозах Dh476 и DO34 (50 мг / кг), при которых, предположительно, остается достаточное количество препарата. ЦНС для блокирования вновь синтезированного белка DAGLα.

Рис. 3.

Временной анализ ингибирования и восстановления DAGLα. ( A ) Динамика ингибирования DAGLα в ткани мозга мышей, получавших носитель (Veh) или Dh476, DO34 и DO53 (50 мг / кг, т.е.p.), как определено конкурентным ABPP с использованием зонда Dh479 (1 мкМ, 30 мин). ( B и C ) Динамика ингибирования DAGLα в ткани мозга мышей, получавших низкую дозу Dh476 (3 мг / кг, внутрибрюшинно), как определено конкурентным ABPP с использованием зонда Dh479 (1 мкМ, 30 мин. ). Данные геля ( B ) и количественная оценка этих данных ( C ) относительно контрольной группы, обработанной носителем, показаны как для DAGLα, так и для ABHD6, нецелевого Dh476. Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 3 мыши на группу.( D и E ) Временной ход прямого мечения DAGLα в ткани мозга мышей, получавших Dh476 (3 мг / кг, внутрибрюшинно), визуализированный с помощью CuAAC для репортерной группы Cy5. Данные геля ( D ) и количественная оценка этих данных ( E ) относительно контрольной группы, обработанной носителем, показаны как для DAGLα, так и для ABHD6. Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 3 мыши на группу.

Ингибиторы DAGL быстро и радикально изменяют липидные профили мозга у мышей.

Три независимо созданные линии мышей DAGLα ^{— / —} показали, что генетическое нарушение этого фермента существенно снижает 2-AG мозга (∼80–90%) (13, 14, 17). Эти изменения 2-AG мозга сопровождаются одновременным накоплением основного предшественника липидов 2-AG и агониста протеинкиназы C (PKC) (35), SAG (17) и истощением основного гидролитического метаболита 2-AG и предшественника эйкозаноидов AA (13 , 14, 17), а также второго основного эндоканнабиноидного анандамида (AEA) (13, 14).Однако остается неясным, какая часть этих широко распространенных изменений отражает активную и динамическую регуляцию липидных сигнальных сетей мозга с помощью DAGLα по сравнению с адаптивными изменениями, вызванными конститутивным долгосрочным устранением этого фермента. Мы решили ответить на этот важный вопрос, изучив липидный профиль мозга мышей, получавших ингибиторы DAGL Dh476 и DO34 и контрольный зонд DO53.

Сначала мы проанализировали липидные профили мозга мышей с помощью ЖХ-МС через 4 часа после введения ингибиторов (50 мг / кг, т.е.p.), который выявил резкое снижение уровня 2-AG у мышей, получавших Dh476 и DO34, но не получавших DO53 (рис. 4 A и набор данных S2). Это снижение 2-AG было сравнимо по величине с тем, которое наблюдалось у мышей DAGLα ^{— / —} (фиг. 4 A и набор данных S2), демонстрируя быстрый поток опосредованной DAGL продукции 2-AG in vivo. Устойчивое истощение 2-AG мозга у мышей, получавших Dh476 и DO34, было дозозависимым ( SI Приложение , рис. S8, A и набор данных S2) и наблюдалось в течение 2 часов после инъекции (рис.4 B , SI Приложение , рис. S8 B и набор данных S2). Зависящие от времени изменения в 2-AG, вызванные Dh476, оказались короче, чем у DO34 (Рис. 4 B , SI Приложение , Рис. S8 B и набор данных S2). Примечательно, что Dh476 и DO34 также вызывали быстрые дозозависимые изменения в других липидах, регулируемых DAGL, включая снижение AEA (рис. 4 C и D , приложение SI , рис. S8 и набор данных S2), AA (рис.4 E и F , SI Приложение , рис. S8 и набор данных S2), а также простагландины PGD ₂ и PGE ₂ (рис. 4 G – J , SI Приложение , Рис. S8 и набор данных S2), а также возвышения в SAG (Рис.4 K и L , SI Приложение , Рис. S8 и Набор данных S2) и C18: 1 / C20: 4 DAG ( Набор данных S2). Изменения в каждом виде липидов снова были аналогичны по величине изменениям, наблюдаемым у мышей DAGLα ^{— / —} (рис.4 C , E , G , I и K ), были дозозависимыми ( SI Приложение , рис. S8 A ), отображали ходы времени, аналогичные изменениям, наблюдаемым в 2 -AG у мышей, получавших Dh476- и DO34 (рис. 4 D , F , H , J и L , и SI, приложение , рис. S8 B ), и отсутствовали у мышей, получавших DO53 (рис. 4 C , E , G , I и K ).Хотя большинство липидных изменений было согласовано у мышей, получавших ингибитор DAGL, и мышей DAGLα ^{— / —} , мы действительно обнаружили, что мыши DAGLα ^{— / —} показали снижение уровня триглицеридов, которое не наблюдалось у животных, получавших ингибиторы DAGL (набор данных S2). . Эти изменения триглицеридов могут, таким образом, потребовать хронической, длительной инактивации DAGLα, который, как известно, вызывает значительное снижение общей массы тела и жира (15).

Рис. 4.

Острое ингибирование DAGL вызывает быстрое и глубокое ремоделирование биоактивных липидных путей в головном мозге.( A , C , E , G , I , K ) Количественное определение 2-AG ( A ) и родственных биоактивных липидов ( C , E , G , I , K ) в ткани мозга мышей, получавших носитель или Dh476, DO34 и DO53 (50 мг / кг, внутрибрюшинно, 4 ч). Для сравнения показаны липидные профили мышей DAGLα ^{— / —} . Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 5–6 мышей на группу.* P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001 для DAGLα ^{+ / +} мышей, обработанных ингибитором, или DAGLα ^{— / —} мышей по сравнению с DAGLα ^{+ / +} мышей, обработанных носителем. ( B , D , F , H , J , L ) Зависимые от времени изменения 2-AG ( B ) и биоактивных липидов ( D , F , H , J , L ) в ткани мозга мышей, получавших Dh476 (50 мг / кг, т.е.п.). Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 4-5 мышей на группу. * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001 для мышей, получавших ингибитор, по сравнению с мышами, получавшими носитель.

Эти исследования, вместе взятые, демонстрируют, что острая фармакологическая блокада DAGL вызывает быструю и драматическую реорганизацию липидных сигнальных сетей в головном мозге млекопитающих, которая в значительной степени отражает бесчисленные липидные изменения, наблюдаемые в мозге мышей DAGLα ^{— / —} .Соответственно, мы затем спросили, будут ли Dh476 и DO34 влиять на физиологические процессы, которые включают один или несколько компонентов DAGL-регулируемой липидной сигнальной сети.

Ингибиторы DAGL блокируют эндоканнабиноид-зависимую синаптическую пластичность.

2-AG функционирует как главный ретроградный посредник в синапсах по всему мозгу, который действует на пресинаптически локализованные CB ₁ Rs, подавляя высвобождение нейромедиатора (20). Различные формы синаптической пластичности регулируются передачей сигналов 2-AG, включая подавление возбуждения (DSE) и ингибирование (DSI), вызванное деполяризацией (20), оба из которых отменены у мышей DAGLα ^{— / —} (13, 14) .Интересно, однако, противоречивые данные о том, биосинтезируется ли ретроградная передача сигналов 2-AG с помощью DAGLα по требованию или, альтернативно, предварительно синтезируется и сохраняется в нейронах перед индуцированным стимулом высвобождением (21-23, 25). Как отмечали другие авторы (21), эти различия могут отражать плохие физико-химические свойства ингибиторов DAGL, используемых в прошлых исследованиях, поскольку высокая липофильность этих молекул может ограничивать их проникновение в препараты ткани мозга, используемые для измерения DSI и DSE, что приводит к неполным результатам. ингибирование DAGL.Поэтому мы протестировали эффекты Dh476, DO34 и DO53 на моделях эндоканнабиноид-зависимой синаптической пластичности.

Сначала мы исследовали DSE на синапсах параллельных волокон (PF) и клеток Пуркинье (PC) в острых срезах мозжечка. Кратковременная деполяризация PCs индуцировала устойчивую временную DSE в синапсах PF-PC в обработанных носителем срезах мозжечка ( SI Приложение , Fig. S9 A ). Нанесение в ванну Dh476 (1–10 мкМ) или DO34 (0,1–1 мкМ) на срезы мозжечка за 30 мин до начала электрофизиологических записей блокировало DSE в зависимости от концентрации с полумаксимальным ингибированием 1.1 мкМ и 0,18 мкМ соответственно ( SI Приложение , рис. S9 A и B ). Контрольный зонд DO53 не изменял DSE мозжечка (10 мкМ) ( SI Приложение , рис. S9, A и B ). Затем мы оценили DSI в синапсах пирамидных нейронов CA1 в срезах гиппокампа. DSI индуцировали в обработанных носителем срезах гиппокампа, применяя кратковременную деполяризацию, вызывая тормозные постсинаптические токи за счет стимуляции синаптических тормозных входов ( SI, приложение , рис.S9 C ). Нанесение в ванну Dh476 (10 мкМ) и DO34 (1 мкМ), но не DO53 (10 мкМ), за 30 мин до начала электрофизиологической регистрации полностью заблокировало DSI гиппокампа ( SI Приложение , рис. S9 C и D ).

Эти результаты подтверждают модель, в которой 2-AG, который регулирует как формы DSE, так и формы DSI синаптической пластичности в головном мозге, производится по требованию с помощью DAGLα.

Ингибиторы DAGL ослабляют нейровоспалительные реакции in vivo.

Опосредованный моноацилглицерин липазой (MAGL или MGLL) гидролиз 2-AG обеспечивает основной источник субстрата АК для синтеза простагландинов в нервной системе при базальных и нейровоспалительных состояниях (36-39).Обнаружив, что острое фармакологическое ингибирование DAGL координированно снижает содержание 2-AG и простагландинов в головном мозге (рис. 4), мы затем спросили, влияет ли блокирование этих ферментов на нейровоспалительные процессы, регулируемые этими биоактивными липидами. Лечение высокими дозами липополисахаридов (ЛПС) индуцирует выработку простагландинов и цитокинов в головном мозге (36, 39) и приводит к глубокой анапирексии у грызунов (40, 41), эффект, который, как считается, опосредуется, по крайней мере частично, простагландинами, продуцируемыми централизованно. и эндоканнабиноиды (40).Было показано, что блокада MAGL подавляет LPS-индуцированную продукцию простагландинов и цитокинов в ЦНС (36, 39), но также усугубляет анапирексию, наблюдаемую в этой парадигме, через CB ₁ R-зависимый механизм (41). Основываясь на этих наблюдениях, мы изучили эффекты фармакологической и генетической инактивации активности DAGL на нейровоспалительные реакции, вызванные LPS.

Мышей лечили Dh476, DO34, DO53 (50 мг / кг, внутрибрюшинно) или носителем (60–90 мин), а затем LPS (20 мг / кг, внутрибрюшинно).p., 6 ч) или носитель, а затем умерщвляют и анализируют их липидный и цитокиновый профили мозга. Как и ожидалось, у мышей, получавших Dh476 и DO34, а также у мышей DAGLα ^{— / —} , но не мышей, получавших DO53, наблюдалось сильное истощение 2-AG мозга (фиг.5 A ), AA (фиг.5 ). B ) и PGE ₂ (рис. 5 C ) в условиях базового контроля. Обработка LPS вызвала умеренное, но значительное увеличение 2-AG (рис. 5 A ), снижение AA (рис. 5 B ) и существенное увеличение PGE ₂ (рис.5 С ). LPS-индуцированное повышение как в 2-AG, так и в PGE ₂ было сильно подавлено у мышей, получавших Dh476 и DO34, и мышей DAGLα ^{— / —} , но не у мышей, получавших DO53. Обработка LPS также увеличивала цитокины мозга, и этот эффект был значительно ослаблен у мышей DAGLα ^{— / —} (фиг. 5 D и SI, приложение , фиг. S10). Мыши, получавшие Dh476 и DO34, также показали снижение LPS-стимулированных цитокинов головного мозга, но интерпретация этих эффектов оказалась сложной, поскольку контрольный зонд DO53 также блокировал выработку цитокинов в мозге в аналогичной степени (рис.5 D и SI Приложение , рис. S10). Эти данные могут указывать на то, что одна или несколько нецелевых, общих для ингибиторов DAGL и DO53, также участвуют, наряду с DAGLα (что подтверждается исследованиями на мышах DAGLα ^{— / —} ), в LPS-индуцированной продукции цитокинов или что активные метаболиты ингибиторов могут подавлять цитокины. Наконец, мы обнаружили, что LPS-индуцированная анапирексия была существенно притуплена у мышей, получавших Dh476 и DO34 (рис. 5 E ) и мышей DAGLα ^{— / —} (рис.5 F ), но не мышей, получавших DO53 (рис. 5 E ).

Рис. 5.

Острое ингибирование DAGL подавляет LPS-индуцированные нейровоспалительные ответы в мозге мышей. ( A-C ) Количественное определение 2-AG и родственных биоактивных липидов в ткани мозга из обработанных носителем или Dh476-, DO34- и DO53 (50 мг / кг, внутрибрюшинно, 1-1,5 ч) или DAGLα ^{— / —} мышей с последующим лечением ЛПС или без него (20 мг / кг, внутрибрюшинно, 6 ч). ( D ) Количественное определение цитокина IL-1β из Dh476-, DO34- и DO53, обработанных (50 мг / кг, т.е.п., 1−1,5 ч) или DAGLα ^{— / —} мышей с последующим лечением ЛПС или без него (20 мг / кг, внутрибрюшинно, 6 ч). Дополнительные измерения цитокинов приведены в приложении SI , рис. S10. Для A-D данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 5-8 мышей на группу. ** P <0,01; *** P <0,001 для всех групп по сравнению с обработанными носителем DAGLα ^{+ / +} мышей и ^### P <0,001 для всех групп по сравнению с обработанными LPS мышами DAGLα ^{+ / +} .( E и F ) Временной ход изменений температуры тела для мышей, предварительно обработанных носителем или Dh476, DO34 и DO53 ( E ), или для DAGLα ^{+ / +} и DAGLα ^{— / —} мышей ( F ) после обработки LPS (10 мг / кг, внутрибрюшинно). Данные представляют собой средние значения ± SEM; n = 5-6. Для E * P <0,05 Veh + Veh по сравнению с группой Veh + LPS; ^# P <0,05 для Dh476 + LPS и DO34 + LPS по сравнению с группой Veh + LPS.Для F , * P <0,05 для DAGLα ^{+ / +} + Veh по сравнению с группами DAGLα ^{+ / +} + LPS; ^# P <0,05 для DAGLα ^{— / —} + Veh по сравнению с группами DAGLα ^{— / —} + LPS; ^и P <0,05 для DAGLα ^{— / —} + LPS по сравнению с группами DAGLα ^{+ / +} + LPS.

Эти результаты в сочетании с предыдущими результатами (36, 39, 41) показывают, что блокада основных ферментов биосинтеза и деградации 2-AG в головном мозге, DAGLα и MAGL, соответственно, вызывает перекрытие (снижение простагландинов и цитокинов в головном мозге). ), но отчетливые (подавление или усиление анапирексии) эффекты на нейровоспаление, вызванное ЛПС.

Обсуждение

Эндоканнабиноиды регулируют синаптическую активность по всей ЦНС и влияют на различные физиологические и поведенческие процессы (42, 43). Ингибиторы ферментов, разрушающих эндоканнабиноиды, оказались полезными для выяснения нейробиологических и поведенческих эффектов, вызванных повышенной активностью эндоканнабиноидов (44). Однако было более сложно определить биологическое воздействие снижения функции эндоканнабиноидов, вызванное в значительной степени отсутствием селективных и активных в отношении ЦНС ингибиторов, которые могут блокировать выработку эндоканнабиноидов in vivo.Хотя мыши DAGLα ^{— / —} и DAGLβ ^{— / —} предоставили ценные модели для исследования in vivo эффектов нарушения биосинтеза эндоканнабиноидов, DAGLα играет важную роль в развитии мозга (13), а хронические изменения в тонусе эндоканнабиноидов могут привести к существенные CB ₁ R адаптации в ЦНС (45, 46) и периферических тканях (47). Эндоканнабиноидная система также взаимодействует с несколькими другими биологически активными липидными путями (8, 48, 49). Степень, в которой эта большая липидная сеть динамически регулируется в ЦНС за счет острого нарушения синтеза эндоканнабиноидов, остается неизвестной.Здесь мы обратились к этим важным вопросам, разработав два селективных, центрально активных необратимых ингибитора DAGL — Dh476 и DO34 — вместе со структурно родственным контрольным зондом DO53. Ключом к разработке этих химических зондов было использование зондов ABPP широкого спектра действия и специализированных зондов для оценки селективности и ингибирования DAGL in vivo.

Введение Dh476 и DO34 мышам показало, что содержание 2-AG в мозге быстро и резко снижается после острой инактивации DAGL.Оба ингибитора также вызывают почти полную блокаду DSE мозжечка и DSI гиппокампа, двух форм CB ₁ R-опосредованной синаптической пластичности (20), только после 30-минутной инкубации в срезах мозга. Эти результаты обеспечивают сильную экспериментальную поддержку модели биосинтеза эндоканнабиноидов по требованию (21) по сравнению с альтернативными гипотезами, требующими хранения и высвобождения 2-AG. Мы также использовали ингибиторы DAGL и специальные зонды активности, чтобы обнаружить, что DAGLα представляет собой белок с коротким периодом полужизни (<4 ч) в ЦНС.Факторы, которые регулируют оборот DAGLα в клетках мозга, остаются неизвестными, но предыдущие исследования показали, что локализация и активность DAGLα регулируются взаимодействиями с белками каркаса (50) и фосфорилированием с помощью CamKII (51). Возможно, что такие белок-белковые взаимодействия и посттрансляционные модификации (> 30 сайтов фосфорилирования было идентифицировано в DAGLα; www.phosphosite.org/homeAction.do) регулируют период полужизни DAGLα в клетках мозга. Также было показано, что синаптическая пластичность, опосредованная эндоканнабиноидами, зависит от транскрипции и трансляции в постсинаптическом нейроне (52), что согласуется с нашими наблюдениями быстрого, продолжающегося производства нового белка DAGLα (рис.3), который генерирует сильный тонический поток 2-AG в головном мозге (рис. 4). Модуляция периода полужизни DAGLα может, таким образом, предоставить нейронам механизм, влияющий на величину и продолжительность передачи сигналов 2-AG и связанных с ними физиологических процессов, таких как обучение и память, которые, как было показано, требуют синтеза и деградации белка (53).

То, что глубокое снижение 2-AG, вызванное ингибиторами DAGL, сопровождалось изменениями в DAG, арахидоновой кислоте, простагландинах и других эндоканнабиноидах (AEA), подчеркивает замечательную интеграцию липидных сигнальных сетей в головном мозге и ключевую роль, которую играют DAGL. в организации этого перекрестного разговора.Хотя мы интерпретируем, что многие изменения липидов, вызванные ингибиторами DAGL, отражают прямой поток субстрата и продуктов через взаимосвязанные метаболические пути (19), другие (например, уменьшение AEA) могут быть косвенным следствием изменений в передаче сигналов липидов. О таких перекрестных взаимодействиях между эндоканнабиноидами, связанных с передачей сигналов, также сообщалось для действия AEA на каналы TRPV1, которые могут влиять на продукцию 2-AG в головном мозге (54). Независимо от точных механизмов, с помощью которых DAGLs оказывают глубокое влияние на липидные сети мозга, наши данные подчеркивают, что интерпретация фенотипов, вызванных нарушением DAGL, должна учитывать больше, чем просто нарушения в передаче сигналов эндоканнабиноидов.В этом отношении наши данные в сочетании с предыдущими исследованиями (41, 55) предполагают, что ослабленные нейровоспалительные ответы у мышей с нарушенным DAGLα, вероятно, отражают интегрированный результат снижения как эндоканнабиноидов, так и эйкозаноидов в головном мозге, хотя дополнительное влияние изменения DAG -опосредованная передача сигналов PKC или другие липидные процессы не могут быть исключены. Кроме того, наше открытие, что контрольный зонд DO53 ослабляет LPS-индуцированную продукцию цитокинов без изменения простагландинов головного мозга или анапирексии, указывает на то, что различные нейровоспалительные эффекты LPS могут быть механистически не связаны.

Наши исследования, вместе взятые, демонстрируют, что Dh476 и DO34, наряду с контрольным зондом DO53 и специализированными зондами активности DAGL, такими как Dh479 и HT-01, составляют ценный набор химических инструментов для изучения различных аспектов функции и регуляции DAGL. в препаратах мозга животных и ex vivo. В дальнейшем этот набор инструментов будет усовершенствован за счет разработки ингибиторов, которые могут избирательно нацеливаться на DAGLα или DAGLβ. Хотя DO34 демонстрирует некоторое предпочтение ингибированию DAGLα по сравнению с DAGLβ in vivo, это окно селективности является узким и, наоборот, центрально-активные селективные ингибиторы DAGLβ все еще отсутствуют.Соответственно, даже несмотря на то, что исследования на генетически поврежденных мышах (13, 14, 17) показали бы, что большинство липидных изменений, вызванных ингибиторами DAGL в головном мозге, являются результатом блокады DAGLα, на данном этапе мы не можем исключить влияние DAGLβ в наших фармакологических экспериментах, особенно при оценке нейровоспалительных эффектов ингибиторов DAGL.

Короткий период полувыведения DAGLα также представляет некоторые проблемы для нашего текущего набора ингибиторов, поскольку их необходимо вводить мышам в относительно высоких дозах (50 мг / кг) для поддержания полного взаимодействия с мишенью в течение длительного (> 8 часов). ) период.Таким образом, улучшение фармакокинетических свойств ингибиторов DAGLα принесет пользу фармакологическим исследованиям, направленным на изучение длительной инактивации DAGLα in vivo. С точки зрения трансляции, будет интересно определить, какой из многих фенотипов, наблюдаемых у мышей DAGLα ^{— / —} , воспроизводится у животных, получавших ингибиторы DAGL. Мыши DAGLα ^{— / —} демонстрируют снижение массы тела, вызванное гипофагией, и в этом отношении напоминают животных с генетическим или фармакологическим нарушением CB ₁ R (15).Люди, получавшие антагонисты / обратные агонисты CB ₁ R, аналогично демонстрируют потерю веса, но в конечном итоге эти препараты были исключены из клиники из-за нейропсихиатрических побочных эффектов (56). Мыши DAGLα ^{— / —} также демонстрируют повышенное поведение, связанное с тревогой, которое можно нормализовать, наряду с частичным восстановлением содержания 2-AG в головном мозге, путем лечения ингибитором MAGL (17).